大鼠脊髓缺血再灌注损伤后CaMKⅡ的表达及作用研究

来源 :中国矫形外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ebear2009
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[目的]探讨钙调蛋白依赖性蛋白激酶2 (CaMKⅡ)在大鼠脊髓缺血再灌注损伤中作用.[方法]雄性SD大鼠56只,随机分为假手术组(n=8)、实验组(n=48),假手术组暴露肾动脉下腹主动脉,但不阻断,实验组采用Nashnd腹主动脉阻断法制作脊髓缺血再灌注损伤模型,于再灌注后0、1、3、7、14、28 d取脊髓标本,HE染色观察脊髓病理变化,免疫组化和Westewrn blot检测CaMKⅡ的表达情况,TUNEL染色检测神经细胞凋亡.[结果]实验组脊髓组织出现明显病理学改变.Western blot在56KD分子量处可见CaMKⅡ蛋白特异性条带,假手术组CaMKⅡ表达较少,实验组0d即出现CaMKⅡ表达增多,且随着时间延长表达量逐渐增多,于3d达高峰后逐渐降低,至14 d时仍高于假手术组(P<0.01).免疫组化结果显示,CaMKⅡ蛋白主要表达于脊髓神经元胞浆,CaMKⅡ阳性细胞数的变化趋势与免疫组化结果相似.TUNEL染色示假手术组有少量凋亡细胞散在分布,实验组术后0d开始出现凋亡细胞增多,3d达高峰,后逐渐减少,28 d时仍高于假手术组(P<0.05).[结论]脊髓缺血再灌注损伤后CaMKⅡ表达增加,同时细胞凋亡数增多,CaMKⅡ可能通过调节细胞凋亡来影响脊髓缺血再灌注损伤.
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