生姜姜辣素的分离及对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用

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目的:本文通过提取和分离生姜姜辣素,探究姜辣素对HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用。方法:采用乙醇作为溶剂,水浴振荡提取得到姜辣素粗提物,通过乙酸乙酯萃取和石油醚对姜辣素粗提物进行纯化。测定姜辣素对1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH)和2,2’-联氮-双-3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸(ABTS)的清除率进行抗氧化活性分析。构建HepG2细胞胰岛素抵抗模型,测定姜辣素对细胞的葡萄糖消耗量、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力和PI3K/AKT通路有关基因表达量的影响。结果:采用正交实验确定乙醇提取姜辣素的最佳条件为:料液比1:50 (g/mL)、提取时间80 min、乙醇体积分数60%、提取温度50 ℃。乙酸乙酯和石油醚萃取后姜辣素含量大于34.55%。抗氧化分析结果表明,姜辣素对DPPH和ABTS的半清除浓度(EC50)分别为0.501 和0.111 mg·mL-1。使用25 μg·mL-1胰岛素处理HepG2细胞48 h后,细胞的葡萄糖消耗量显著降低(P<0.05)。姜辣素显著提高了细胞的葡萄糖消耗量、SOD和CAT活力(P<0.05),并呈现剂量依赖性。此外,姜辣素处理组均显著上调PI3K、IRS-2和AKT基因的表达量(P<0.05),并能显著下调GSK-3β、FoxOI和PEPCK的表达量。结论:生姜姜辣素具有良好的抗氧化活性,且通过激活PI3K/AKT通路预防HepG2细胞的胰岛素抵抗作用。
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