【摘 要】
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目的 探讨敲低死亡受体5(DR5)表达对重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rmhTRAIL)联合5氟尿嘧啶(5-FU)抑制人结直肠癌(CRC)HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养人CRC HCT116细胞,用DR5 shRNA质粒转染,构建敲低DR5的CRC HCT116/shRNA细胞系(HCT116/KD);MTS法检测rmhTRAIL、5-FU及两者联用对HCT116/KD细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测细胞凋亡信号通路中凋亡相关蛋白C
【机 构】
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承德市中心医院放化疗科,河北承德067000;承德医学院研究生院;承德医学院基础医学研究所
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目的 探讨敲低死亡受体5(DR5)表达对重组变构人肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(rmhTRAIL)联合5氟尿嘧啶(5-FU)抑制人结直肠癌(CRC)HCT116细胞增殖及凋亡的影响.方法 体外培养人CRC HCT116细胞,用DR5 shRNA质粒转染,构建敲低DR5的CRC HCT116/shRNA细胞系(HCT116/KD);MTS法检测rmhTRAIL、5-FU及两者联用对HCT116/KD细胞增殖的影响;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blotting法检测细胞凋亡信号通路中凋亡相关蛋白Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9、PARP和PARP裂解片段表达.结果 成功构建敲低DR5的CRC HCT116/KD细胞系;MTS及流式细胞术结果显示,敲低DR5表达后,rmhTRAIL单药及与5-FU联用对CRC HCT116细胞的增殖抑制及凋亡诱导作用减弱;Western blotting结果显示,rmhTRAIL单药及其联合5-FU作用于HCT116/KD细胞,Caspase-3、Caspase-9和PARP表达未见明显下降(P均>0.05).结论 敲低DR5表达后rmhTRAIL单药及其联合5-FU干预HCT116细胞,细胞增殖受抑减弱,凋亡减少.
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