体外高表达肿瘤坏死样因子配体1A的巨噬细胞对肝星状细胞活化与增殖的影响

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chunyi19871225
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目的

探讨体外高表达肿瘤坏死样因子配体1A(TL1A)的巨噬细胞对肝星状细胞(HSCs)的活化、增殖的影响。

方法

分离、分化并活化C57BL/6野生型(WT)与髓系高表达TL1A的转基因(M-Tg)小鼠骨髓来源的巨噬细胞(BMMs)和腹腔巨噬细胞(PMs);并分离WT小鼠原代HSCs;收取活化后的巨噬细胞培养上清液为条件培养基(CM)干预HSCs,应用免疫荧光法及real-time Q-PCR方法检测HSCs的活化、CCK-8法及BrdU法检测HSCs增殖情况,酶联免疫吸附试验法测定各组巨噬细胞培养上清液中白细胞介素1β和血小板衍生生长因子(PDGF)-BB的含量。

结果

应用BMMs来源的CM干预HSCs,免疫荧光法分别检测第2、4、6天α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达量,第2天和第6天时各组间差异无统计学意义,P > 0.05;第4天时CM/Tg组明显高于CM/WT组,P < 0.01;PMs来源的CM干预HSCs的检测结果与上述趋势一致。应用BMMs来源的CM干预HSCs,real-time Q-PCR法分别检测第2、4、6天α-SMA mRNA表达量,第2天时各组差异无统计学意义,P > 0.05;第4、6天时α-SMA mRNA进一步升高,且CM/Tg组明显高于CM/WT组,P < 0.05;PMs来源的CM培养HSCs的检测结果与上述趋势一致。CCK-8法和BrdU法检测HSCs增殖速度结果显示CM/Tg组明显高于CM/WT组,P < 0.01;应用PMs来源的CM干预HSCs,检测结果与上述趋势一致。对于BMMs、脂多糖+干扰素γ/Tg组培养上清液中白细胞介素1β和PDGF-BB表达水平显著高于脂多糖+干扰素γ/WT组,P < 0.01;PMs的培养上清液检测结果与上述趋势一致。

结论

高表达TL1A的巨噬细胞可能通过IL-1β和PDGF-BB分泌增加促进HSCs的活化与增殖。

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