猪囊尾蚴磷蛋白基因P2的克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :中国人兽共患病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shingohit
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本研究从猪囊尾蚴虫体中提取总RNA,用磷蛋白特异性引物,通过RT-PCR扩增出-366bp的片段,扩增产物连接到PGEM-Teasy载体中,经酶切鉴定、PCR分析以及确证性测序后证明,所克隆的366bp的片段含P2蛋白基因完整的开放阅读框.将重组质粒PGEM-P2和表达载体pProEX-HTb分别酶切后,亚克隆至原核表达载体pProEX-HTb中,筛选阳性克隆,用IPTG诱导表达,收集不同时间的菌液进行SDS-PAGE电泳、Western blot分析,结果表明,磷蛋白基因p2在大肠杆菌中成功表达,其表达
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