论文部分内容阅读
目的构建脂多糖（LPS）和地塞米松（Dex）作用后的肺泡巨噬细胞（AMs）酵母双杂交cDNA文库，探寻炎症条件下与糖皮质激素受体（（讯）相互作用的蛋白质分子。方法用LPS（10mg／ml）和Dex（10^-5mol／L）作用于原代培养的肺泡巨噬细胞4h后，从肺泡巨噬细胞中提取总RNA，再以SMARTⅢ^TM和CDSⅢoligo（dT）为引物进行PCR扩增，得到两端具有同源臂的双链cDNA，后者纯化后，与线性质粒pGADTZ-Rec共转化感受态酵母菌AH109，二者在酵母细胞中同源重组成环形的有复制活性的c