利用NusA促溶标签原核表达Butelase 1蛋白

来源 :江西农业学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：login_action

【摘要】

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为获得可溶性Butelase 1蛋白,将Butelase 1基因插入到带有NusA促溶标签的原核表达载体上,将重组质粒转化至大肠杆菌（E.coli）BL21（DE3）感受态细胞中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和层析

【作者】

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刘起涛朱彦策王伟杰陈佩格孙士平郭婉莹郑悦亭

【机构】

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河南农业大学农业部动物生化与营养重点开放实验室,河南省洛阳市疾病预防控制中心

【出处】

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江西农业学报

【发表日期】

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2017年3期

【关键词】

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Butelase 1 促溶标签 NUSA 表达分析 Butelase 1 Solubility-enhancing tag Nus A Expressio

【基金项目】

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转基因生物新品种培育重大专项（2014ZX0801015B）, 河南省教育厅基础与前沿技术研究项目（152300410070）, 河南省高等学校重点科研项目计划（14A230010）

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为获得可溶性Butelase 1蛋白,将Butelase 1基因插入到带有NusA促溶标签的原核表达载体上,将重组质粒转化至大肠杆菌（E.coli）BL21（DE3）感受态细胞中进行诱导表达,用Ni-NTA亲和层析法纯化表达的可溶性蛋白,用SDS-PAGE和Western blot分析蛋白的表达情况。酶切和测序结果证实p ET21b-His6-NusA-Butelase 1原核表达载体构建成功。SDS-PAGE分析结果表明诱导后表达的融合蛋白大小为94.9 k D,主要为可溶性表达,部分为包涵体表达。We

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