survivin短发夹状RNA真核表达载体的构建及其对宫颈癌细胞survivin表达的影响

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目的:构建survivin基因短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体,并观察其对宫颈癌细胞survivin表达的抑制作用。方法:设计、合成2对survivin特异性微小片段RNA引物(s1、s2),退火连接后利用DNA重组技术,将其分别克隆入真核表达载体pSilencer 2.1-U6 neo,酶切、鉴定测序后,经脂质体转染宫颈癌HeLa细胞,G418筛选阳性克隆,半定量RT—PCR检测survivin mRNA表达,Western blot检测survivin蛋白表达。结果:成功构建了survivin
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