【摘 要】
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目的 利用细胞共培养系统研究转基因诱导表达的分泌型人骨形成蛋白2(hBMP-2),对NIH3T3细胞超微结构和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法用阳离子聚合物转染试剂将hBMP-2真核表达载体pcDNA3.1-B2导入NIH3T3细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆.免疫组化和酶联免疫吸附试验检测BMP-2胞内和胞外的表达,并利用细胞共培养系统Transwell,将转基因细胞与NIH3T3细胞共培
【机 构】
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210029,南京医科大学口腔医学院牙周科,210029,南京医科大学口腔医学院牙周科,南京医科大学微生物与免疫学系,南京医科大学微生物与免疫学系
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目的 利用细胞共培养系统研究转基因诱导表达的分泌型人骨形成蛋白2(hBMP-2),对NIH3T3细胞超微结构和碱性磷酸酶(ALP)活性的影响.方法用阳离子聚合物转染试剂将hBMP-2真核表达载体pcDNA3.1-B2导入NIH3T3细胞,G418筛选获得阳性细胞克隆.免疫组化和酶联免疫吸附试验检测BMP-2胞内和胞外的表达,并利用细胞共培养系统Transwell,将转基因细胞与NIH3T3细胞共培养.结果转染hBMP-2基因的NIH3T3细胞胞内和胞外都有BMP-2的表达.与转基因细胞共培养的NIH3T3细胞在共培养后超微结构的变化和ALP的高表达,都提示其向成骨样细胞分化的趋势.结论经转基因诱导表达的分泌型BMP-2具有诱导成纤维细胞向成骨样细胞分化的作用。
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