【摘 要】
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为高效表达黑曲霉糖化酶基因,根据GenBank中糖化酶的氨基酸序列（登录号：AY652617）,选用毕赤酵母（Pichiapastoris）密码子偏嗜性,全基因合成新的cDNA序列。改造后的基因克隆到pGAPZ
【基金项目】
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广东省现代农业生猪产业技术体系（F10021）
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为高效表达黑曲霉糖化酶基因,根据GenBank中糖化酶的氨基酸序列（登录号：AY652617）,选用毕赤酵母（Pichiapastoris）密码子偏嗜性,全基因合成新的cDNA序列。改造后的基因克隆到pGAPZαA质粒中,获得重组分泌型酵母表达质粒pGAPZαA-EC,经限制性内切酶BlnⅠ酶切线性化后,电击转化入毕赤酵母细胞X33内。经高浓度博莱霉素抗性筛选,得到高拷贝转化子,PCR检测结果显示,糖化酶基因与毕赤酵母染色体稳定结合。糖化酶蛋白获得分泌表达,SDS-PAGE分析其分子质量约为80ku,其表
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