重楼皂苷Ⅱ诱导黑色素瘤细胞B16F10铁死亡的作用研究

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目的 探讨重楼皂苷Ⅱ对黑色素瘤细胞B16F10的抑制作用及可能的作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度的重楼皂苷Ⅱ对黑色素瘤细胞B16F10的抑制作用;透射电镜(TEM)观察细胞线粒体结构的变化;流式细胞仪检测活性氧(ROS)的变化;试剂盒检测铁死亡相关指标丙二醛(MDA)的含量、超氧化物歧化酶(SOD)的含量、铁(Fe)的含量及谷胱甘肽(GSH)的水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白的表达变化。结果 与空白组相比,重楼皂苷Ⅱ处理后B16F10细胞的活性显著降低,具有剂量和时间依赖性。TEM可以观察到重楼皂苷Ⅱ处理后B16F10细胞中线粒体结构发生皱缩变小以及膜密度增加的变化。重楼皂苷Ⅱ作用后ROS的水平、MDA和Fe的含量提高,SOD的含量和GSH的水平降低。除此之外,重楼皂苷Ⅱ可以抑制黑色素瘤细胞B16F10中GPX4、FTH-1、SLC7A11蛋白的表达水平而促进P53、ACSL4蛋白的表达水平。结论 重楼皂苷Ⅱ可以抑制黑色素瘤细胞B16F10增殖,其可能与诱导细胞发生铁死亡有关。
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