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目的
观测慢性肾功能不全幼鼠胫骨生长板软骨细胞初级纤毛表达对细胞增殖的影响。
方法雄性2周龄SD幼鼠20只,随机分为假手术组(切开暴露左侧输尿管)和慢性肾功能不全(CRI)组(左侧输尿管结扎),每组10只。术后2周处死幼鼠,测量胫骨全长并行组织学切片观测生长板增殖区细胞生长状态及细胞初级纤毛表达率。分别提取两组胫骨生长板区软骨细胞进行体外培养至P3代,检测细胞24 h增殖率,细胞初级纤毛表达率和纤毛长度;Western印迹检测细胞纤毛转运体88(IFT88)蛋白表达水平并进行灰度分析。
结果CRI组幼鼠胫骨长度短于假手术组[(35.84±4.56)mm比(42.33±3.44)mm,P=0.002];胫骨生长板增殖区细胞在CRI组排列紊乱,细胞柱细胞数量少[(2.71±1.10)个/HP比(7.68±1.32)个/HP,P<0.001];CRI组细胞初级纤毛表达率较高[(35.53±7.41)%比(18.31±5.12)%,P<0.001]。与假手术组比较,CRI组体外培养生长板软骨细胞24 h增殖率较低[(11.38±6.10)%比(24.35±8.46)%,P=0.001],细胞初级纤毛表达率较高[(60.12±7.86)%比(32.17±8.97)%,P<0.001],细胞初级纤毛长度较长[(3.54±1.61)μm比(1.96±0.82)μm,P=0.012],IFT88蛋白表达量较高(0.47±0.23比0.17±0.10,P=0.001)。
结论CRI幼鼠胫骨生长板增殖区软骨细胞初级纤毛表达率增高,细胞增殖率降低,生长板发育受限。