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目的:获得具有较多保守抗原表位的HIV-1膜重组抗原,提高HIV筛选ELISA试剂的质量。方法:利用分子克隆与PCR方法,获得了新的HIV-1膜重组抗原的基因克隆,编码gp120C端亲水区37个氨基酸残基(env482~518)以及gp41膜外部分的128个氨基酸残基(env548~675)。将该基因克隆到pGEMEX-1载体上融合表达,表达蛋白经纯化后,以1μg/ml的浓度包被ELISA板,用来检测卫生部药品生物制品检定所提供的HIV-1标准血清。结果:在大肠杆菌中有效表达了新的重组HIV-1膜抗原,表达产物以包涵体的形式存在,提取包涵体后,通过制备电泳将重组蛋白纯化。单独使用该抗原建立的间接ELISA分析,可以检测出标准血清中所有的11份阳性血清;而与标准血清中的28份阴性血清均无交叉反应。结论:重组膜抗原由于含盖了HIV膜抗原的主要表位,是HIV-1ELISA筛选分析的良好试剂。