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【目的】建立一套可靠的早产鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞（AECⅡ）分离、纯化和培养技术，用于体外研究早产儿肺部疾病。【方法】采用胰酶和胶原酶消化胎龄20d早产鼠肺组织块，经差速离心和反复贴壁法，分离、纯化早产鼠AECⅡ，并进行原代培养。用细胞角化蛋白（cytokeratin）进行二氨基联苯胺（DAB）及荧光免疫细胞化学显色，和透射电镜对所分离的细胞进行鉴定。【结果】AECⅡ体外培养24～48h，增殖代谢旺盛，进入对数生长期，生长状态最佳。cytokeratin在DAB免疫细胞化学及荧光免疫细胞化学中均有表达。透射电