【摘 要】
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目的:构建人CaNAα(钙调神经磷酸酶催化亚基α异构体,calcineurin catalytic subunit alpha isoform)RNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV并鉴定。方法:根据CaNAαmRNA选择靶区、设计合
【机 构】
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第四军医大学附属唐都医院肿瘤科,陕西省肿瘤医院乳腺科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(编号:30873028)
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目的:构建人CaNAα(钙调神经磷酸酶催化亚基α异构体,calcineurin catalytic subunit alpha isoform)RNAi慢病毒载体PPP3CA-RNAi-LV并鉴定。方法:根据CaNAαmRNA选择靶区、设计合成shRNAs及无关对照序列,酶切连接pGCSIL-PUR载体,经测序鉴定阳性克隆,提取质粒、转染SBC-5细胞,经real-timePCR及Western blot检测CaNAα沉默水平;选择高沉默效率的pGCSIL-PUR-shRNA3进行慢病毒颗粒包装,浓缩纯化
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