【摘 要】
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目的 研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中环状RNA circ＿BRAF＿2的表达及其对胎盘滋养细胞自噬的影响。方法 选取妊娠对照组与PE组胎盘组织各22例；将HTR-8/SVneo细胞分为对照组（常规培养）、pLV-NC组（转染空载体）、pLV-circ＿BRAF＿2组（转染circ＿BRAF＿2）、缺氧组（缺氧处理）、pLV-NC+缺氧组（转染空载并进行缺氧处理）、pLV-circ＿BRAF＿2
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（No.81760270）； 宁夏自然科学基金资助项目（No.2020AAC02038,No.2020AAC03380）； 宁夏回族自治区重点研发计划重点基金资助项目（No.2019BFG02004）;宁夏回族自治区重点研发计划重点基金资助项目（No.2021BEG02028）；
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目的 研究子痫前期（PE）患者胎盘组织中环状RNA circ＿BRAF＿2的表达及其对胎盘滋养细胞自噬的影响。方法 选取妊娠对照组与PE组胎盘组织各22例；将HTR-8/SVneo细胞分为对照组（常规培养）、pLV-NC组（转染空载体）、pLV-circ＿BRAF＿2组（转染circ＿BRAF＿2）、缺氧组（缺氧处理）、pLV-NC+缺氧组（转染空载并进行缺氧处理）、pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组（转染circ＿BRAF＿2并进行缺氧处理）。用实时荧光定量聚合酶链反应（qRT-PCR）检测胎盘组织及HTR-8/SVneo细胞中circ＿BRAF＿2的表达，用PCR及Sanger测序对HTR-8/SVneo细胞中circ＿BRAF＿2进行鉴定，用核质分离法检测circ＿BRAF＿2在HTR-8/SVneo细胞胞质和细胞核中的表达，用透射电镜观察细胞自噬体的形成，用蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）、P62的表达。用qRT-PCR检测miR-15a-5p的表达水平。结果 妊娠对照组、PE组、对照组及缺氧组circ＿BRAF＿2的相对表达水平分别为0.89±0.05,0.32±0.03,0.04±0.05×10-1和0.02±0.03×10-1,PE组与妊娠对照组相比，缺氧组与对照组相比，差异均有统计学意义（均P＜0.01）;通过外扩型引物只能在cDNA中扩增出circ＿BRAF＿2,而采用内扩型引物能同时在cDNA和gDNA中扩增出其线性转录本BRAF;circ＿BRAF＿2在HTR-8/SVneo细胞胞质中的表达(0.02±0.02×10-1)显著高于在胞核中的表达(0.02×10-2±0.03×10-3,P＜0.01);对照组、pLV-NC组、pLV-circ＿BRAF＿2组、缺氧组、pLV-NC+缺氧组、pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组LC3-Ⅱ蛋白相对表达水平分别为0.75±0.25,0.73±0.23,0.75±0.23,1.17±0.30,1.19±0.32和0.42±0.06,P62蛋白相对表达水平分别为0.72±0.07,0.75±0.09,0.72±0.08,0.45±0.11,0.44±0.10和0.62±0.07,缺氧组的上述指标与对照组相比，pLV-circ＿BRAF＿2+缺氧组的上述指标与pLV-NC+缺氧组相比，差异均有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）;这6组的单个细胞内自噬体数量变化及miR-15a-5p的相对表达水平变化与LC3-Ⅱ蛋白表达变化水平相同。结论 过表达circ＿BRAF＿2可抑制缺氧诱导的HTR-8/Svneo细胞自噬，其作用可能与竞争性结合miR-15a-5p有关。
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