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摘要：采用二次发酵隧道技术处理不同配方培养料，以不同含氮量和不同石膏含量的双孢蘑菇培养料为研究对象，对其进行建堆发酵、接种养菌、出菇管理，并对其进行堆肥温度、菌丝生长速度、培养料含氮量和生物学效率的测定和分析。结果表明，以高产、高生物学效率为目标结合生产成本因素，最后确定含氮量1.3％、石膏含量2％、石灰含量2％、磷肥含量1.5％的培养料更适于应用生产。
关键词：双孢蘑菇；培养料；发酵；菌丝生长速度；生物学效率
我国双孢蘑菇栽培始于20世纪20-30年代，由于受诸多社会和经济因素制约，我国双孢蘑菇栽培技术和发达国家相比仍然落后、发展缓慢。福建、浙江等沿海省份一直是双孢蘑菇的主产地，近年来河南、河北、山东等省双孢蘑菇栽培迅速发展，也成为鲜蘑菇的重要产区，在石家庄双孢菇新品种双孢褐菇发展也极为迅速。黑龙江省的双孢菇栽培尚处于起步阶段。但该省生产双孢蘑菇的原材料极为丰富，而且拥有昼夜温差大的气候优势，发展双孢蘑菇产业潜力巨大。
双孢蘑菇(A garicus bisporus)是目前世界上人工栽培最广泛、产量最高、消费量最大的食用菌，约占世界食用菌总产量的40％左右，也是我国目前最大宗的出口创汇食用菌。蘑菇生长发育所需要的营养物质主要包括碳水化合物(糖类)、含氮化合物、无机盐类及生长因子，其中碳水化合物和含氮化合物主要来源于农作物秸秆和畜禽粪便，是基本的营养物质，粪草的配比合理与否直接影响堆肥的发酵品质和双孢蘑菇生产的成败。在双孢蘑菇生长中，适宜的培养料配方、厚度等因素对其生物学效率的影响至关重要，因此，本试验设置7种不同培养料配方，在黑龙江省寒地条件下进行栽培试验，以试验数据为依据，阐述不同发酵料对双孢蘑菇栽培的影响，从而更好的指导和发展生产。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试菌株：As2796，由福建省轻工业研究所提供：主要原料：干牛粪、干稻草、石膏、石灰、磷肥等。
1.2 试验方法
1.2.1 不同培养料配方试验设置7个处理，见表1。每个处理栽培面积2m2，共计16m2，每m2按30kg培养料计算。根据已测定的牛粪氮素含量(1.57％)与稻草氮素含量(0.68％)及其含水量，计算出7种处理对应的粪草含量和其他添加物含量。
1.2.2 培养料发酵方法7种处理粪草料按照设计准确称质量，预湿后按照1层草1层粪的方式建成高1.5m、宽1.5m的发酵堆。各处理堆彼此紧挨，并须用网兜隔开。第1次翻堆时均匀加入对应的石灰、石膏量，第2次翻堆时加入过磷酸钙，每次翻堆都要调节含水量，使培养料最后1次翻堆发酵后含水量达65％-68％。共经过4次翻堆，在14d内完成，然后装入隧道，进行7d的2次发酵。
1.2.3 铺料与播种把经过后发酵的培养料，按照床栽方式均匀平铺在出菇室的床架上，每个处理的培养料铺成厚0.2m，宽1.0m，长2m。待培养料温度降至30℃以下时接种，每个处理(2m2)接种4瓶(1200g)菌种，均匀撒于料面上，覆盖报纸保湿，之后进行养菌、出菇管理。此间记录和测定各处理菌丝生长速度、现蕾时间、生物学效率。
1.3 项目测定
1.3.1 干牛粪、干稻草含氮量 牛粪氮素含量测定采用浓硫酸一铬粒混合催化剂消煮法，稻草氮素含量测定采用浓硫酸一过氧化氢消煮法。
1.3.2 不同培养料含氮量 每次翻堆在不同点取样，测其含氮量。
1.3.3 不同碳氮比培养料菌丝生长速度菌丝生长期间测定和记录各处理、各时期菌丝生长速度，包括菌丝封面时间、菌丝长满料时间。
1.3.4 不同碳氮比培养料现蕾时间 菌丝长满料经覆土后，记录各处理第1次出现蘑菇原基时间。
1.3.5 不同碳氮比培养料生物学效率
出菇期内，及时采收子实体，准确称质量，记录产量，比较各处理生物学效率，
生物学效率(％)=(子实体湿质量，培养料干质量)X100
2 结果与分析
2.1 不同含氮量培养料发酵温度比较
不同含氮量培养料在发酵过程中其温度变化规律基本是一致，建堆2d后，堆温上升至60-70℃，4-5d后堆温略有下降，立即进行翻堆，改变通气状况、混匀培养料后温度立即下降至55℃左右，5-6d后温度继续升高。发酵过程中5种不同含氮量培养料温度不同，其中以含氮量1.9％的培养料发酵温度最高，最高温度达72℃，整个发酵过程温度普遍高于其他4个处理。温度最低的是含氮量为1.1％培养料，其顶部最高温度也没有超过65℃(图1)。
2.2 不同配方培养料在发酵过程中含氨量变化
2.2.1 不同含氮量培养料发酵过程中含氮量变化5种不同含氮量培养料在前发酵结束时的含氮量分别增加了0.28％、0.27％、0.26％、0.22％、0.21％。经过后发酵又分别增加了0.28％、0.28％、0.26％、0.27％、0.25％。经过前发酵和后发酵含氮量增加最多的是含氮量1.1％的培养料，增加了0.56％，增量最小的是含氮量1.9％的培养料，增加了0.46％。含氮量1.3％、1.5％的培养料发酵结束时含氮量分别是1.85％、1.98％。发酵结束堆肥含氮量在1.80％-2.20％，可以得到较高的产菇量(图2)。
2.2.2 不同石膏含量培养料发酵过程中含氮量变化
3种不同石膏含量培养料发酵结束的含氮量最高的是石膏含量4％的培养料，含氮量为1.91％；其次是石膏含量2％的培养料，发酵结束含氮量为1.85％，但发酵结束后与石膏含量4％的培养料含氮量差异不明显：发酵结束后含氮量最低的是石膏为0％的处理(表)。
2.3 不同含氨量培养料对发酵结束pH值的影响
堆肥发酵结束时，含氮量1.9％的处理5pH值为8.4，最高，含氮量越小发酵结束时pH值越低(表3)。pH值7.0-8.0的培养料适合蘑菇菌丝的生长。
2.4 不同配方培养料对菌丝生长速度及现蕾时间的影响
7种不同配方培养料中，菌丝封面时间最快的是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7，其次是石膏含量2％、含氮量1.1％和1.3％的处理1、2.最慢的是石膏含量2％、含氮量1.9％的处理5。长满料时间最快的也是石膏含量4％的处理7，其次是含氮量1.3％的处理2，最慢的是石膏含量2％、含氮量1.9％的处理5。现蕾时间最快的仍是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7，其次是含氮量1.3％、石膏含量2％的处理2，最慢的也仍是含氮量1.9％的处理5(表4)。
2.5 不同配方培养料对双孢蘑菇生物学效率的影响
生物学效率高低是评价培养料优劣和栽培成功与否最直接、最重要的因素。前3茬菇7个处理中，生物学效率最高的是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7.生物学效率为28.5％，但与表现其次石膏含量2％、含氮量1.3％的处理2差异不显著。生物学效率最低的是石膏含量2％、含氮量1.1％的处理1，仅为19.1％(表)。
3 讨论
采用干牛粪、稻草、石膏、石灰、磷肥为主要原料，以不同含氮量和石膏含量为配方，对双孢蘑菇进行出菇试验和生物学分析，结果表明，含氮量1.3％、石膏含量4％的配方，双孢蘑菇菌丝的生长速度和现蕾时间都是最快的，产量也是最高的，其主要原因可能是此配方碳氮比合适，而发酵过程中碳氮比合适的培养料发酵效果好，有益微生物丰富，有利于双孢蘑菇菌丝营养物质积累：而其他配方碳素、氮素含量少，不适合双孢蘑菇生长，不利于微生物增殖，发酵效果不好，菌丝生长不旺盛，导致产量低。在含氮量为1.3％、石膏含量分别为2％与4％的配方中，双孢蘑菇生物学效率最高。说明加石膏可补充蘑菇生长对硫、钙营养元素的需要，还能加速堆肥中有机质的分解，促使堆肥中可溶性磷、钾迅速释放，供给蘑菇菌丝吸收利用，从而提高双孢蘑菇质量，增加蘑菇产量。
4 结论
通过试验对照分析得出，石膏含量4％、含氮量为1.3％的发酵料，在发酵结束后含氮量是1.91％，双孢蘑菇菌化此培养料的生物学效率、封面时间、长满料时间和现蕾时间最快。但是含氮量1.3％、石膏含量分别为2％和4％的2个配方生物学效率差异不显著，其中含氮量1.3％、石膏含量2％的配方与前人关于发酵结束堆肥含氮量在1.80％-2.00％、pH值7.5左右，可以得到较高的产菇量结论一致。因为上述2个配方差异不显著，所以在实际生产中，考虑到生产成本等因素，可以采用石膏含量2％、含氮量1.3％的配方进行生产。
关键词：双孢蘑菇；培养料；发酵；菌丝生长速度；生物学效率
我国双孢蘑菇栽培始于20世纪20-30年代，由于受诸多社会和经济因素制约，我国双孢蘑菇栽培技术和发达国家相比仍然落后、发展缓慢。福建、浙江等沿海省份一直是双孢蘑菇的主产地，近年来河南、河北、山东等省双孢蘑菇栽培迅速发展，也成为鲜蘑菇的重要产区，在石家庄双孢菇新品种双孢褐菇发展也极为迅速。黑龙江省的双孢菇栽培尚处于起步阶段。但该省生产双孢蘑菇的原材料极为丰富，而且拥有昼夜温差大的气候优势，发展双孢蘑菇产业潜力巨大。
双孢蘑菇(A garicus bisporus)是目前世界上人工栽培最广泛、产量最高、消费量最大的食用菌，约占世界食用菌总产量的40％左右，也是我国目前最大宗的出口创汇食用菌。蘑菇生长发育所需要的营养物质主要包括碳水化合物(糖类)、含氮化合物、无机盐类及生长因子，其中碳水化合物和含氮化合物主要来源于农作物秸秆和畜禽粪便，是基本的营养物质，粪草的配比合理与否直接影响堆肥的发酵品质和双孢蘑菇生产的成败。在双孢蘑菇生长中，适宜的培养料配方、厚度等因素对其生物学效率的影响至关重要，因此，本试验设置7种不同培养料配方，在黑龙江省寒地条件下进行栽培试验，以试验数据为依据，阐述不同发酵料对双孢蘑菇栽培的影响，从而更好的指导和发展生产。
1 材料与方法
1.1 试验材料
供试菌株：As2796，由福建省轻工业研究所提供：主要原料：干牛粪、干稻草、石膏、石灰、磷肥等。
1.2 试验方法
1.2.1 不同培养料配方试验设置7个处理，见表1。每个处理栽培面积2m2，共计16m2，每m2按30kg培养料计算。根据已测定的牛粪氮素含量(1.57％)与稻草氮素含量(0.68％)及其含水量，计算出7种处理对应的粪草含量和其他添加物含量。
1.2.2 培养料发酵方法7种处理粪草料按照设计准确称质量，预湿后按照1层草1层粪的方式建成高1.5m、宽1.5m的发酵堆。各处理堆彼此紧挨，并须用网兜隔开。第1次翻堆时均匀加入对应的石灰、石膏量，第2次翻堆时加入过磷酸钙，每次翻堆都要调节含水量，使培养料最后1次翻堆发酵后含水量达65％-68％。共经过4次翻堆，在14d内完成，然后装入隧道，进行7d的2次发酵。
1.2.3 铺料与播种把经过后发酵的培养料，按照床栽方式均匀平铺在出菇室的床架上，每个处理的培养料铺成厚0.2m，宽1.0m，长2m。待培养料温度降至30℃以下时接种，每个处理(2m2)接种4瓶(1200g)菌种，均匀撒于料面上，覆盖报纸保湿，之后进行养菌、出菇管理。此间记录和测定各处理菌丝生长速度、现蕾时间、生物学效率。
1.3 项目测定
1.3.1 干牛粪、干稻草含氮量 牛粪氮素含量测定采用浓硫酸一铬粒混合催化剂消煮法，稻草氮素含量测定采用浓硫酸一过氧化氢消煮法。
1.3.2 不同培养料含氮量 每次翻堆在不同点取样，测其含氮量。
1.3.3 不同碳氮比培养料菌丝生长速度菌丝生长期间测定和记录各处理、各时期菌丝生长速度，包括菌丝封面时间、菌丝长满料时间。
1.3.4 不同碳氮比培养料现蕾时间 菌丝长满料经覆土后，记录各处理第1次出现蘑菇原基时间。
1.3.5 不同碳氮比培养料生物学效率
出菇期内，及时采收子实体，准确称质量，记录产量，比较各处理生物学效率，
生物学效率(％)=(子实体湿质量，培养料干质量)X100
2 结果与分析
2.1 不同含氮量培养料发酵温度比较
不同含氮量培养料在发酵过程中其温度变化规律基本是一致，建堆2d后，堆温上升至60-70℃，4-5d后堆温略有下降，立即进行翻堆，改变通气状况、混匀培养料后温度立即下降至55℃左右，5-6d后温度继续升高。发酵过程中5种不同含氮量培养料温度不同，其中以含氮量1.9％的培养料发酵温度最高，最高温度达72℃，整个发酵过程温度普遍高于其他4个处理。温度最低的是含氮量为1.1％培养料，其顶部最高温度也没有超过65℃(图1)。
2.2 不同配方培养料在发酵过程中含氨量变化
2.2.1 不同含氮量培养料发酵过程中含氮量变化5种不同含氮量培养料在前发酵结束时的含氮量分别增加了0.28％、0.27％、0.26％、0.22％、0.21％。经过后发酵又分别增加了0.28％、0.28％、0.26％、0.27％、0.25％。经过前发酵和后发酵含氮量增加最多的是含氮量1.1％的培养料，增加了0.56％，增量最小的是含氮量1.9％的培养料，增加了0.46％。含氮量1.3％、1.5％的培养料发酵结束时含氮量分别是1.85％、1.98％。发酵结束堆肥含氮量在1.80％-2.20％，可以得到较高的产菇量(图2)。
2.2.2 不同石膏含量培养料发酵过程中含氮量变化
3种不同石膏含量培养料发酵结束的含氮量最高的是石膏含量4％的培养料，含氮量为1.91％；其次是石膏含量2％的培养料，发酵结束含氮量为1.85％，但发酵结束后与石膏含量4％的培养料含氮量差异不明显：发酵结束后含氮量最低的是石膏为0％的处理(表)。
2.3 不同含氨量培养料对发酵结束pH值的影响
堆肥发酵结束时，含氮量1.9％的处理5pH值为8.4，最高，含氮量越小发酵结束时pH值越低(表3)。pH值7.0-8.0的培养料适合蘑菇菌丝的生长。
2.4 不同配方培养料对菌丝生长速度及现蕾时间的影响
7种不同配方培养料中，菌丝封面时间最快的是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7，其次是石膏含量2％、含氮量1.1％和1.3％的处理1、2.最慢的是石膏含量2％、含氮量1.9％的处理5。长满料时间最快的也是石膏含量4％的处理7，其次是含氮量1.3％的处理2，最慢的是石膏含量2％、含氮量1.9％的处理5。现蕾时间最快的仍是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7，其次是含氮量1.3％、石膏含量2％的处理2，最慢的也仍是含氮量1.9％的处理5(表4)。
2.5 不同配方培养料对双孢蘑菇生物学效率的影响
生物学效率高低是评价培养料优劣和栽培成功与否最直接、最重要的因素。前3茬菇7个处理中，生物学效率最高的是石膏含量4％、含氮量1.3％的处理7.生物学效率为28.5％，但与表现其次石膏含量2％、含氮量1.3％的处理2差异不显著。生物学效率最低的是石膏含量2％、含氮量1.1％的处理1，仅为19.1％(表)。
3 讨论
采用干牛粪、稻草、石膏、石灰、磷肥为主要原料，以不同含氮量和石膏含量为配方，对双孢蘑菇进行出菇试验和生物学分析，结果表明，含氮量1.3％、石膏含量4％的配方，双孢蘑菇菌丝的生长速度和现蕾时间都是最快的，产量也是最高的，其主要原因可能是此配方碳氮比合适，而发酵过程中碳氮比合适的培养料发酵效果好，有益微生物丰富，有利于双孢蘑菇菌丝营养物质积累：而其他配方碳素、氮素含量少，不适合双孢蘑菇生长，不利于微生物增殖，发酵效果不好，菌丝生长不旺盛，导致产量低。在含氮量为1.3％、石膏含量分别为2％与4％的配方中，双孢蘑菇生物学效率最高。说明加石膏可补充蘑菇生长对硫、钙营养元素的需要，还能加速堆肥中有机质的分解，促使堆肥中可溶性磷、钾迅速释放，供给蘑菇菌丝吸收利用，从而提高双孢蘑菇质量，增加蘑菇产量。
4 结论
通过试验对照分析得出，石膏含量4％、含氮量为1.3％的发酵料，在发酵结束后含氮量是1.91％，双孢蘑菇菌化此培养料的生物学效率、封面时间、长满料时间和现蕾时间最快。但是含氮量1.3％、石膏含量分别为2％和4％的2个配方生物学效率差异不显著，其中含氮量1.3％、石膏含量2％的配方与前人关于发酵结束堆肥含氮量在1.80％-2.00％、pH值7.5左右，可以得到较高的产菇量结论一致。因为上述2个配方差异不显著，所以在实际生产中，考虑到生产成本等因素，可以采用石膏含量2％、含氮量1.3％的配方进行生产。