【摘 要】
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水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达。传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求。因此研究通过比较定量除
【机 构】
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福建省农业科学院水稻研究所,农业部华南杂交水稻种质创新与分子育种重点实验室/福州（国家）水稻改良分中心/福建省作物种质创新与分子育种省部共建国家重点实验室培育基地/杂交水稻国家重点实验室华南研究基地/
【基金项目】
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福建省自然科学基金项目(2015J05059);国家自然科学基金项目(31401471,31501387);福建省科技计划项目——省属公益类科研院所基本科研专项(2017R1021-6);福建省农业科学院青年英才计划项目(YC2016-16,YC2015-14);福建省农业科学院杰出青年人才基金(JC2018-2)
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水稻转化过程中,多个拷贝数整合到基因组中影响遗传稳定性和基因表达。传统的Southern杂交检测法鉴定费时费力,不适合目前高通量和自动化的检测要求。因此研究通过比较定量除草剂草铵膦抗性基因(bar)和甘油醛-3-磷酸脱氢酶GAPDH2,建立了基于实时荧光定量PCR的拷贝数检测法。利用此体系对9个独立的异天冬氨酸甲基转移酶OsPIMT1转基因T0代植株进行了荧光定量分析,其中6个为单拷贝,3个为双拷贝,经过Southern杂交和分离比分析验证,表明该方法能够快速,准确的鉴定水稻含有草铵膦抗性基因的水稻转基因植株。
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