目的　利用梯度洗脱 ,建立高效液相色谱测定丹参酮滴耳液中二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 含量的方法。方法　采用高效液相色谱法。IntersilC18分析色谱柱 (4 6mm× 2 5 0mm ,5 μm) ,流动相为乙腈 10 %乙腈梯度洗脱 ,流速1 6mL·min-1,检测波长 2 5 4nm。结果　二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 保留时间分别为 11 9,19 2 ,2 1 3和2 8 5min ,与各自相邻峰的分离度均大于 1 5 ,理论板数分别为 3310 ,4 2 78,36 2 4和 2 0 6 77。二氢丹参酮Ⅰ平均回收率为10 1 3% ,RSD =2 2 % ,隐丹参酮平均回收率为 97 2 % ,RSD =2 2 % ,丹参酮Ⅰ平均回收率为 10 2 1% ,RSD =3 0 % ,丹参酮ⅡA平均回收率为 99 5 % ,RSD =1 9%。二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 最低检出浓度分别约为 0 6 ,0 9,0 6和0 3μg·mL-1。结论　本法操作简便 ,测定结果准确可靠 ,可用于丹参酮滴耳液中二氢丹参酮Ⅰ、隐丹参酮、丹参酮Ⅰ和丹参酮ⅡA 的含量测定。