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目的：建立检测血清中25-羟维生素D3[25（OH）D3]的高效液相色谱分析方法。方法：样品用甲醇沉淀蛋白，以正己烷提取后，离心取上清液过膜。甲醇-水（95∶5）为流动相，选用Venusil MP-C18（250 mm×4.6 mm,5μm）色谱柱进行色谱分离，流速为1.0 mL/min，紫外检测波长265 nm，柱温30℃。结果：25（OH）D3在线性范围4.00-160.00μg/L内与其响应值线性关系良好（r=0.9999），4.00、8.00、16.00、80.00μg/L的25（OH）