初步探讨阴道上皮细胞IgG的分泌及其抗白假丝酵母菌的作用。
方法(1)采用免疫组化EnVision二步法检测正常阴道上皮细胞系VK2/E6E7细胞中IgG的表达情况。(2)以下实验分为3组，VK2/E6E7细胞中加入不同比例的白假丝酵母菌，白假丝酵母菌∶细胞的比例分别为1∶10、1∶1，即为酵母菌+细胞(1∶10)组和酵母菌+细胞(1∶1)组；以不加入白假丝酵母菌，单纯培养的VK2/E6E7细胞为空白对照组。倒置显微镜下观察3组VK2/E6E7细胞培养24 h后的生长状况；ELISA法检测3组VK2/E6E7细胞分别培养0、3、6、12、24、48 h后上清液中IgG的含量。
结果(1)免疫组化EnVision二步法检测显示，VK2/E6E7细胞呈多角形，细胞核呈淡蓝色，IgG表达于细胞质，呈强阳性表达，为弥漫的棕褐色染色颗粒；阴性对照细胞仅见淡蓝色细胞核，未见棕色染色颗粒。(2)倒置显微镜下观察，3组VK2/E6E7细胞培养24 h后，空白对照组细胞轮廓清晰，折光性强，细胞核较大，为圆形或椭圆形，呈铺路石样外观。酵母菌+细胞(1∶10)组白假丝酵母菌开始发芽、呈球拍状，部分向菌丝相转化，生长密度较低；细胞与白假丝酵母菌相互靠近，细胞的折光性降低，细胞质内出现空泡和黑色小颗粒，细胞形态较完整。酵母菌+细胞(1∶1)组可见白假丝酵母菌对细胞具有明显的侵袭作用，假菌丝密集交错、生长旺盛，细胞数量减少，细胞核散大，细胞膜形态不完整，细胞崩解，细胞间连接松散，部分区域细胞脱落、凋亡。ELISA法检测显示，分别培养0、3、6、12、24、48 h, 3组细胞上清液中IgG的含量在各时间点分别比较，差异均有统计学意义(P<0.01)；酵母菌+细胞(1∶10)组细胞上清液中IgG的含量在3、6、12、24 h时分别与酵母菌＋细胞(1∶1)组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。当白假丝酵母菌与VK2/E6E7细胞的比例为1∶1且共同培养24 h时，IgG的含量最高，为(1.61±0.05)μg/ml。
结论白假丝酵母菌对阴道上皮细胞具有明显的侵袭作用，并随着白假丝酵母菌浓度的增加，对细胞的侵袭作用增强。阴道上皮细胞与白假丝酵母菌共同培养后可减少上皮源性IgG的分泌。