蜡样芽孢杆菌烯醇还原酶基因的克隆、表达和酶学性质研究

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从蜡样芽孢杆菌WZY004基因组DNA中克隆获得了烯醇还原酶基因.并在大肠杆菌BL21(DE3)中以可溶形式过量表达。重组烯醇还原酶经Ni—NTA亲和层析分离纯化后.对其酶学性质进行了详细表征。该重组酶经SDS—PAGE检测为单一条带.其分子量为38.2kD。该酶最适pH和温度分别为7.5与60℃。对氧代异佛尔酮的Km和‰。值分别为1.83mmol/L与1.13U/mg。底物特异性分析表明该酶对柠檬醛、2-甲基-2-戊烯醛和反式-2-癸烯醛均有较高活力,其中对柠檬醛的比酶活高达1.33U/mg。
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