【摘 要】
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目的 观察系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移、增殖变化,并探讨IKB激酶复合物(IKK-β)对SLE患者BMSCs迁移及增殖的影响.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离
【机 构】
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南京大学医学院附属鼓楼医院风湿免疫科
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目的 观察系统性红斑狼疮(SLE)患者骨髓间充质干细胞(BMSCs)迁移、增殖变化,并探讨IKB激酶复合物(IKK-β)对SLE患者BMSCs迁移及增殖的影响.方法 采用密度梯度离心和贴壁分离法分离培养6例SLE患者及6名健康人BMSCs；通过细胞划痕实验和构建侵袭小室检测BMSCs迁移、活细胞计数(CCK-8)检测BMSCs增殖能力；实时荧光定量聚合酶链反应技术检测IKK-β mRNA表达水平；蛋白印迹法检测IKK-β、磷酸化IKK-β表达水平；观察加入IKK-β抑制剂对SLE患者BMSCs增殖、迁移的影响.采用t检验或Mann-Whitney秩和检验.结果 ①体外培养过程中,SLE患者BMSCs迁移率(5.2±3.8)‰与增殖能力(0.21±0.49)显著低于健康对照组BMSCs迁移率(7.0±2.9)‰及增殖能力(1.00±0.35),差异有统计学意义(P＜0.05);②SLE患者BMSCs IKK-β基因表达水平(1.9±1.4)与健康人(1.9±2.4)相比差异无统计学意义(P＞0.05)；SLE患者BMSCs磷酸化IKK-β蛋白表达水平(1.41±0.19)显著高于健康人(0.93±1.24),差异有统计学意义(P＜0.05)；③IKK-β抑制剂能够增加SLE患者BMSCs的迁移率(3.3±1.6)‰和增殖能力(1.13±0.26),高于未加IKK-β抑制剂组迁移率(2.3±1.1)‰与增殖能力(0.8l±0.17),差异有统计学意义(P＜0.05).结论 SLE患者BMSCs在体外培养过程中,迁移、增殖能力较健康人显著降低,其机制可能是SLE患者体内IKK-β的表达增加,通过活化核因子-KB信号通路,影响迁移与增殖相关基因的表达,从而抑制了BMSCs的迁移与增殖.
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