【摘 要】
:
[目的]构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析.[方法]采用PCR法扩增人AFP基因启动子.回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆
论文部分内容阅读
[目的]构建AFP启动子介导HSV-TK基因表达载体,并对其在肝癌细胞中特异性表达进行分析.[方法]采用PCR法扩增人AFP基因启动子.回收纯化后克隆入pBluescript Ⅱ KDR-TK相同克隆位点,切取AFP-TK片段,然后通过酶联反应插入到pEGFP-C1中,构建成pEGFP-C1-AFP-TK.对获得的片段进行鉴定、细胞靶向和外源基因表达的鉴定.[结果]序列分析表明,该启动子含300 bp核苷酸,与已报道的序列比较,100%相符.限制性酶切分析,重组质粒pEGFP-C1-AFP-TK已经克隆AFP启动子.RT-PCR及Western blotting分析pEGFP-C1-AFP-TK转染后的HepG2细胞后,表明TK基因在mRNA水平上能有效的表达,裂解后的HepG2细胞膜蛋白中有相对分子质量约61~83 ku大小的特异性条带.[结论]人肝细胞癌(HepG2)靶向性质粒pEGFP-C1-AFP-TK构建成功.
其他文献
早甜葡萄具有成熟期早、果粒大、品质优、适应性广、结果性好、栽培管理较容易等优点,是新罗区适宜发展的鲜食葡萄品种.要取得早甜葡萄丰产稳产、优质低耗,栽培上应重点抓好
宁杂11号属甘蓝型半冬性早熟杂交油菜新品种,母本是隐性细胞核雄性不育两用系G2A,父本是双低恢复系P10,2004年育成,2007年通过国家品种审定,2008年通过江苏省品种审定.该品种
吉R 105是采用地理远缘杂交和姊妹交的方法选育成的配合力高、恢复性强、综合性状好、抗性强、适应性广的优良恢复系.该系主要含有亨加利高粱亲缘.利用吉R 105配制出许多杂交
通过PCR扩增获得鸡福氏志贺菌产超广谱β-内酰胺酶SHV-12和TEM-1V型ESBLs基因片段,定向克隆入质粒载体构建重组质粒,酶切和DNA测序鉴定后转化受体菌BL21,用SDS-PAGE电泳观察
目的 探讨纤维蛋白胶与脂肪组织来源干细胞(ASCs)共同移植后是否能发挥协同作用,促进脂肪注射移植的存活.方法 从人脂肪组织中分离培养ASCs,并在体外扩增培养3代.将ASCs与人
目的 比较不同品系大鼠哮喘模型的表现特征.方法 用卵蛋白和氢氧化铝诱导DA、DA.1u、E3、DE和SD品系大鼠哮喘模型,比较它们的肺指数,迟发超敏反应,肺泡灌洗液中的白细胞数、
为了探索约束钢梁的高温性能及不同温度路径和参数的影响,本文采用大型有限元程序ANSYS对四种不同温度路径和四个不同参数下约束钢梁的性能反应进行分析研究。计算时充分考虑
为方便烟农能及时、有效、准确地获得各种涉烟涉农信息,促进信息资源的共享和利用,开发了农村信息机移动终端.农村信息机内容丰富,服务方式多样,传递及时快速.应用实践证明,
为探讨禽类β-防御素13(gallinaein-13,Gal-13)作为鱼用抗生素替代品的可能性,将150尾同塘同规格尼罗罗非鱼鱼种随机等分为2组:对照组喂商品罗非鱼饵料;Gal-13组在该饵料中添
为摸索鞭角华扁叶蜂允许为害指标和抽样技术,通过摘叶模拟危害测定其允许为害水平,并开展了鞭角华扁叶蜂的生活史、食叶量、空间分布和抽样技术等研究.结果表明鞭角华扁叶蜂1