【摘 要】
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目的 了解2009-2011年青岛地区甲型H1N1流行性感冒病毒(简称流感病毒)的全基因组特征.方法 选取2009-2011年青岛地区流行的甲型H1N1流感病毒35株,提取病毒RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增各基因片段,并进行序列测定;用Sequencher软件完成序列拼接.选取GenBank收录的25条全球同期甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因全长序列作为参照,用Mega
【机 构】
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266033山东省青岛市疾病预防控制中心微生物与寄生虫检验科,266033山东省青岛市疾病预防控制中心微生物与寄生虫检验科,266033山东省青岛市疾病预防控制中心微生物与寄生虫检验科,266033山
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目的 了解2009-2011年青岛地区甲型H1N1流行性感冒病毒(简称流感病毒)的全基因组特征.方法 选取2009-2011年青岛地区流行的甲型H1N1流感病毒35株,提取病毒RNA,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增各基因片段,并进行序列测定;用Sequencher软件完成序列拼接.选取GenBank收录的25条全球同期甲型H1N1流感病毒血凝素(HA)基因全长序列作为参照,用Mega 5.0软件对各基因片段进行系统发育分析及分子特征分析;下载2010年8月至2011年3月间全球分离的1068条该型HA序列用于氨基酸变异分析.结果 在HA基因进化树上,2009-2010、2010-2011年监测季毒株各分列4个分支,每监测季各有一个优势分支.2009-2010年监测季优势分离株HA基因核苷酸同源性为99.6％～99.9％,编码氨基酸同源性为99.1％ ～ 99.8％,2010-2011年监测季优势分离株HA基因核苷酸同源性为99.1％ ～ 99.6％,编码氨基酸同源性为98.2％ ～99.1％,两季优势分离株间HA基因核苷酸同源性为98.8％～99.8％,编码氨基酸同源性为98.0％～99.6％.病毒HA蛋白与疫苗株比较,各监测季分别有14、12处氨基酸变异,涉及10个抗原位点及5个阳性选择位点.神经氨酸酶(NA)蛋白247位、274位氨基酸均分别为丝氨酸(247S)、组氨酸(274H),M2蛋白31位氨基酸均为天冬酰胺(31N).结论 2009-2011年青岛地区流行的甲型H1N1流感病毒在持续不断地发生变异而产生抗原漂移;毒株全部为烷胺类药物耐药株,但对神经氨酸酶抑制剂敏感。
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目的 建立黄酒中氨基甲酸甲酯(MC)和氨基甲酸乙酯(EC)同时测定的气相色谱质谱方法.方法 黄酒中MC和EC经9-占吨醇衍生后,用气相色谱质谱法(GC/MS)测定两种衍生物,采用D5-EC同位素内标法进行定量分析.结果 本测定方法MC和EC的线性范围为2.0～ 400.0 μg/L,相关系数分别为0.998和0.999,定量限和检出限分别为0.67和2.0μg/kg,黄酒中加入2.0 ～ 300.
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