目的：研究分析南京市第一医院近1年来铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，PA）临床分布及耐药情况，为抗菌药物选择及合理应用提供循证证据。方法：对我院2012年6月至2013年6月检出的354株铜绿假单胞菌，采用回顾性研究分析其临床分布，使用 K-B 纸片扩散方法检测药物敏感性，SPSS 17.0统计软件分析结果。结果：254株铜绿假单胞菌，主要发生在 ICU、呼吸科、感染性疾病科，分别占29.1%，27.4%，23.4%，标本主要来源于下呼吸道的痰标本，占56.8%。铜绿假单胞菌对亚胺培南、美罗培南、头孢哌酮/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星有较低的耐药率，对氨苄西林、头孢唑林、头孢呋辛钠、头孢呋辛酯、头孢西丁、复方新诺明有耐药率高。结论：我院近一年检出铜绿假单胞菌主要见于 ICU、呼吸科及感染科病房痰叶标本，耐药现象严重，需加强耐药性检测，指导临床合理使用抗生素，控制医院感染。