【摘 要】
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[目的]研究人参基因组SRAP-PCR的扩增条件,建立其优化扩增体系。[方法]采用单因子实验方法探讨模板DNA、引物浓度、dNTPs浓度、Mg^2+浓度等因素对PCR结果的影响。[结果]优化后
【机 构】
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吉林农业大学中药材学院,吉林人参研究院
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[目的]研究人参基因组SRAP-PCR的扩增条件,建立其优化扩增体系。[方法]采用单因子实验方法探讨模板DNA、引物浓度、dNTPs浓度、Mg^2+浓度等因素对PCR结果的影响。[结果]优化后的扩增程序为:94℃预变性2 min;94℃变性30 s,48℃复性30 s,72℃延伸1 min,共40次循环;72℃延伸7 min。最佳反应体系为:DNA模板30 ng,上下游引物浓度2.0μmol/L,dNTPs浓度0.3 mmol/L,Mg^2+2.5 mmol/L,总体积25μl。[结论]建立了满足人参SR
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