目的:利用网络药理学预测雷公藤治疗三阴性乳腺癌（TNBC）的有效成分、靶点及相关信号通路,体外细胞模型验证其分子机制。方法:通过中药系统药理数据库（TCMSP）筛选雷公藤活性成分;疾病相关基因与突变位点数据库（DisGeNET）和基因数据库（GeneCards）获取TNBC疾病靶点;Venny平台整合雷公藤治疗TNBC的潜在靶点;String数据库构建蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络;DAVID数据库进行基因本体（GO）功能注释和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;AutoDock Vina对雷公藤甲素与核心靶点进行分子对接;噻唑蓝（MTT）比色法检测雷公藤甲素(0、5、10、20、30、40、50、60、80 nmol·L-1)对MDA-MB-231细胞的增殖抑制活性;Hoechst 33342染色法分析雷公藤甲素(0、12.5、25、50 nmol·L-1)诱导MDA-MB-231细胞凋亡;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测雷公藤甲素(0、25、50 nmol·L-1)对关键靶点的表达调控。结果:预测结果显示雷公藤23个活性成分对应55个TNBC作用靶点,靶点共涉及生物过程103种,细胞组成15种,分子功能35种,参与脂质与动脉粥样硬化、细胞凋亡等细胞信号通路140条;雷公藤甲素与核心靶点蛋白激酶B1（Akt1）、血管内皮生长因子A（VEGFA）、细胞肿瘤抗原p53（p53）、转录因子AP-1（JUN）、信号转导及转录激活因子3（STAT3）、肿瘤坏死因子（TNF）、丝裂原活化蛋白激酶8（MAPK8）、前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）的对接结合活性较高;MTT比色法结果表明,与空白组比较,雷公藤甲素(20、30、40、50、60、80 nmol·L-1)能明显抑制三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖（P<0.05,P<0.01）;Hoechst 33342染色结果显示,与空白组比较,雷公藤甲素(12.5、25、50 nmol·L-1)MDA-MB-231细胞凋亡率升高（P<0.05,P<0.01）;Western blot实验表明,与空白组比较,雷公藤甲素(50 nmol·L-1)作用后细胞中p-Akt、VEGFA和TNF-α相对表达水平降低（P<0.05,P<0.01）,雷公藤甲素(25、50 nmol·L-1)组p53相对表达水平升高（P<0.05,P<0.01）,呈浓度依赖性。结论:雷公藤治疗TNBC具有多成分、多靶点、多通路的特点,其机制与调节p53、VEGFA、TNF-α等靶点,进而诱导细胞凋亡、抑制血管生成及炎症反应等有关,为后续深入基础研究及临床应用提供了科学依据。