【摘 要】
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目的:探讨SD胎鼠海马神经干细胞（NSCs）源性外泌体（Exos）的提取、鉴定。方法:选取15 d胎鼠海马组织提取NSCs,首先光镜下观察细胞生长的形态变化，免疫荧光组织化学染色法检测巢蛋白（nestin）的表达；然后诱导分化培养基继续培养，行神经元特异性微管蛋白（β-tubulin-III）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光组织化学染色鉴定NSCs,最后收集细胞培养上清液，按照梯度离心方法提
【机 构】
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贵州医科大学基础医学院人体解剖学教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金（81660243）； 贵州省科技厅自然科学基金（黔科合基础-ZK[2021]一般415）； 贵州医科大学国家自然基金培育项目（20NSP006）；
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目的:探讨SD胎鼠海马神经干细胞（NSCs）源性外泌体（Exos）的提取、鉴定。方法:选取15 d胎鼠海马组织提取NSCs,首先光镜下观察细胞生长的形态变化，免疫荧光组织化学染色法检测巢蛋白（nestin）的表达；然后诱导分化培养基继续培养，行神经元特异性微管蛋白（β-tubulin-III）、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）免疫荧光组织化学染色鉴定NSCs,最后收集细胞培养上清液，按照梯度离心方法提取、纯化Exos,电子显微镜下观察其形态特点，纳米颗粒分析检测其粒径大小，Western Blot检测其特异性标志物CD9、CD63、肿瘤易感基因101（TSG101）的表达。结果:成功分离、培养了SD胎鼠海马来源的NSCs,光镜下细胞呈典型神经球状生长，nestin表达阳性。NSCs经过诱导培养后成功分化为神经元和星形胶质细胞，β-tubulin-III与GFAP呈阳性表达。电子显微镜下Exos呈现双层膜的杯口状结构，平均粒径（171.8±67.6） nm, CD9、CD63与TSG101蛋白呈阳性表达。结论:分离并培养了15 d胎鼠海马来源的NSCs,成功提取NSCs来源的Exos。
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