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目的
观察L型氨基酸转运载体1(LAT1)对结直肠癌细胞增殖和迁移能力的影响。
方法设计并合成靶向LAT1的小干扰RNA(siLAT1)和阴性对照小干扰RNA(siCON)，并在结直肠癌细胞株HT29中进行转染，48 h后利用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测目的基因mRNA和蛋白水平的表达，进行敲降效率的验证。利用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验检测干扰组(siLAT1组)和阴性对照组(siCON组)细胞增殖，利用Transwell实验检测siLAT1组和siCON组细胞的迁移能力。
结果siLAT1和siCON瞬时转染HT29细胞48 h后，siLAT1对HT29细胞LAT1 mRNA表达的抑制率为(73.2±5.2)%，差异有统计学意义(t＝11.410，P<0.01)。Western blot结果进一步证实靶向LAT1的小干扰RNA(siRNA)的敲减效率(0.68±0.06比0.21±0.04，t＝4.492，P<0.05)。CCK-8实验表明LAT1基因敲降后的细胞株HT29增殖能力弱于阴性对照组(P<0.01)。Transwell迁移实验表明在转染后siLAT1组迁移细胞数明显小于阴性对照组(66±11比156±29，t＝5.083，P<0.05)。
结论LAT1表达下调抑制了结直肠癌肿瘤细胞的增殖和迁移过程。