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摘要：为成功提取盗窃案件中现场遗留指印的DNA，用502胶熏显指印，用棉签二次转移法提取检材上显现的指印痕迹，再使用硅珠法提取脱落细胞DNA，经AmpFISTR IdentifilerPlus试剂盒复合扩增，3500XL遗传分析仪电泳检测和GeneMapperID-X软件基因分型，成功对502胶熏显的指印DNA做出了STR分型，确定了2起盗窃案件的嫌疑人。
关键词：指印；脱落细胞；STR分型
中图分类号：D919文献标识码：A文章编号：2095-4379-（2018）32-0152-02
作者简介：邓娜（1989-），女，汉族，河南郑州人，本科，郑州铁路公安局刑事技术处，法医师，研究方向：DNA检验；吴振山（1972-），男，汉族，河南郑州人，本科，郑州铁路公安局刑事技术处，副主任法医师，研究方向：DNA检验。
Application of touch DNA testing into Unearthing Theft Cases
DENG Na，WU Zhen-shan
Forensic Science Institute of Zhengzhou Railway Public Security Bureau，Henan，Zhengzhou 450000，China
Abstract：This paper introduces analysis of fingerprint DNA collected from theft cases.Fingerprint was developed with 502 glue，and the double swab technique was used to collect the shed cells.DNA，individually extracted from swabs collected in theft cases by an improved silica-bead method，was amplified by AmpFISTR Identifiler？ Plus system，followed to conduct electrophoresis by 3500XL genetic analyzer，and finally undergone the genotyping by GeneMapper？ ID-X software.STR pro？les were determined.This method had been successfully applied in 2 theft cases.
Key words：Finger print；Touch DNA；STR typing
在铁路盗窃案件中，潜在生物物证，尤其脱落细胞的发现难、提取难是制约DNA证据使用的瓶颈。近年来，随着DNA检验技术的不断发展，微量痕迹物证发现、提取等方法的日趋成熟，为铁路公安侦破案件提供了突破口。本文结合笔者日常工作中的实际案例，在经过502胶熏显后的指印处，使用棉签二次转移法提取指印表面脱落细胞，并用硅珠法提取纯化DNA，获得STR分型，比中嫌疑人，成功破获案件。一、案例资料
（一）2017年2月，某地火车站内旅客携带的现金被盗，报警后勘查现场，提取到被透明胶带缠绕的书籍一本，送检要求做DNA检验。
（二）2017年4月，某铁路沿线铝锭被盗，现场遗留长条状铝锭捆扎带数根，提取遗留的金属捆扎带送检，要求做DNA检验鉴定。二、检验方法
（一）痕迹检验人员首先对送检的检材进行502胶熏显，但熏显出的指印痕迹残缺不全，不具备指纹检验鉴定和入库比对条件。
（二）法医物证检验人员在熏显出的指印痕迹处，使用棉签二次擦拭转移，先取一根棉签，将其头部蘸取少量蒸馏水，擦拭指印处，再用另一根干棉签头部擦拭同一部位。将棉签拭子用硅珠法提取纯化DNA，使用D盾超敏提取试剂盒。
步骤为：①剪取棉签擦拭子适量放入离心套管内，缓慢向套管中滴加裂解混合液（裂解液 A：裂解液 B=5：1）200μL，56℃温浴45min，再99℃裂解10min；②将离心管投入-20℃冰箱内迅速降温至常温，再加吸附液200μL，后放入离心机内13000r/min离心2min，开盖后去离心套管，再加入吸附液800μL，吸附珠悬液20μL混合均匀，室温静置15min；③8000r/min离心1min，除去上清液，向沉淀物加入-20℃漂洗液800μL，充分混匀；④8000r/min离心1min，去漂洗液；⑤开启管盖56℃烘干吸附珠2min；⑥加洗脱液20μL，充分混匀后56℃保温15min，4℃保存待扩增用。
采用AmpFISTR IdentifilerPlus试剂盒 在 9700 型扩增仪上对 16 个基因座进行复合扩增，体系为 20μL，其中 DNA 模板8μL，28个循环反应。取 30μL 内标 LIZ500 和1000μL 去离子甲酰胺混合，取混合物10μL 加入1μL 扩增产物，以 3500XL 遗传分析仪毛细管电泳，Collection 软件收集数据，GeneMapperID-X软件做等位基因分型。三、结果
在两个案例中，均获得完整STR分型，图谱峰高均在1500以上，均衡性较好，质量高；将结果导入DNA数据库，案例1比中本地库人员；案例2比中全国库人员。据此，抓获上述犯罪嫌疑人，相关案件告破。
四、讨论
由于铁路流动性大、人员密集，发生在铁路上的盗窃案件，尤其是列车上的财物被盗案件通常不能明确案发时间和具体地点，没有传统意义上的现场，只遗留少量犯罪嫌疑人触摸过的物品（如钱包、捆扎物等），故在这些物品上发现提取到嫌疑人的指纹和脱落细胞成为侦破案件的关键。脱落细胞提取过程中肉眼很难发现，具体位置不能确定，如果盲目提取，难以获得所需要的靶DNA；如果大面积擦拭，靶DNA的浓度就会下降，且可能会遭到外来污染或干扰。为解决上述问题，在非渗透客体上遗留的汗潜指印处提取脱落细胞，是一种针对性强且又简单易行的方法。
痕迹检验时，常用502胶熏显法显现指印，但不是每一份检材均可显现出清晰、有比对鉴定价值的指纹。有一部分检材熏显后只能看到模糊不清或残缺不全的指印，这类指印在比对检验时没有利用价值，但却给DNA检验人员提取脱落细胞指明了方向，在指印处转移提取脱落细胞比盲目提取的检出率要高出很多。本文中的两例案件，都是在502胶熏显后的模糊指印处，利用擦拭转移法提取脱落细胞，最终获得较好的STR分型图谱。从图谱的峰值结果来看，经502胶熏显后的检材样本DNA的含量并不低，均能获得理想的STR分型。
根据笔者的实践经验，在转移提取时采用棉签二次擦拭转移法效果更佳，因为指印处的脱落细胞在502胶熏显过程中，发生了离子聚合，可将脱落细胞封在检材上，二次擦拭转移法通过反复擦拭、干湿结合，能最大限度地提取到脱落细胞。同时，由于检材上脱落细胞数量本来就少，转移提取后数量更少，为提高检出率，在提取纯化环节，可使用灵敏度更高的D盾试剂盒硅珠法进行提纯，并在复合扩增时适当调整模板DNA的用量及体系以获得较好的分型数据。
综上所述，经过502胶熏显后的检材仍可通过检验人体脱落细胞，获得STR分型，进行比对认定或入库查询，最大限度利用物证，为侦查破案提供证据。[参考文献]
[1]纪中华.交通事故中汗潜指印DNA检验[J].刑事技术，2015，40（2）：162-163.
[2]李忠杰，徐杰，何伟，等.手套印DNA检验在盗窃案件中的应用[J].刑事技术，2016，41（2）：170-172.
[3]董正志，韩清顺，郭科建，等.触摸痕中接触DNA检验概述[J].中国法医学杂志，2015，30（3）：270-272.
[4]黄艳梅，王萌鸽，赵兴春等.接触DNA在法医实践中的应用研究进展[J].中国法医学杂志，2016，31（2）：151-155.
[5]袁则平.棉签二次转移法有效提取现场手套印脱落细胞DNA[J].刑事技术，2013（5）：50-51.
[6]高婧宇，梁克偉，李鹏飞，等.“502”胶显现指纹后对脱落细胞DNA提取的影响研究[J].中国刑警学院学报，2014（2）：52-53.
关键词：指印；脱落细胞；STR分型
中图分类号：D919文献标识码：A文章编号：2095-4379-（2018）32-0152-02
作者简介：邓娜（1989-），女，汉族，河南郑州人，本科，郑州铁路公安局刑事技术处，法医师，研究方向：DNA检验；吴振山（1972-），男，汉族，河南郑州人，本科，郑州铁路公安局刑事技术处，副主任法医师，研究方向：DNA检验。
Application of touch DNA testing into Unearthing Theft Cases
DENG Na，WU Zhen-shan
Forensic Science Institute of Zhengzhou Railway Public Security Bureau，Henan，Zhengzhou 450000，China
Abstract：This paper introduces analysis of fingerprint DNA collected from theft cases.Fingerprint was developed with 502 glue，and the double swab technique was used to collect the shed cells.DNA，individually extracted from swabs collected in theft cases by an improved silica-bead method，was amplified by AmpFISTR Identifiler？ Plus system，followed to conduct electrophoresis by 3500XL genetic analyzer，and finally undergone the genotyping by GeneMapper？ ID-X software.STR pro？les were determined.This method had been successfully applied in 2 theft cases.
Key words：Finger print；Touch DNA；STR typing
在铁路盗窃案件中，潜在生物物证，尤其脱落细胞的发现难、提取难是制约DNA证据使用的瓶颈。近年来，随着DNA检验技术的不断发展，微量痕迹物证发现、提取等方法的日趋成熟，为铁路公安侦破案件提供了突破口。本文结合笔者日常工作中的实际案例，在经过502胶熏显后的指印处，使用棉签二次转移法提取指印表面脱落细胞，并用硅珠法提取纯化DNA，获得STR分型，比中嫌疑人，成功破获案件。一、案例资料
（一）2017年2月，某地火车站内旅客携带的现金被盗，报警后勘查现场，提取到被透明胶带缠绕的书籍一本，送检要求做DNA检验。
（二）2017年4月，某铁路沿线铝锭被盗，现场遗留长条状铝锭捆扎带数根，提取遗留的金属捆扎带送检，要求做DNA检验鉴定。二、检验方法
（一）痕迹检验人员首先对送检的检材进行502胶熏显，但熏显出的指印痕迹残缺不全，不具备指纹检验鉴定和入库比对条件。
（二）法医物证检验人员在熏显出的指印痕迹处，使用棉签二次擦拭转移，先取一根棉签，将其头部蘸取少量蒸馏水，擦拭指印处，再用另一根干棉签头部擦拭同一部位。将棉签拭子用硅珠法提取纯化DNA，使用D盾超敏提取试剂盒。
步骤为：①剪取棉签擦拭子适量放入离心套管内，缓慢向套管中滴加裂解混合液（裂解液 A：裂解液 B=5：1）200μL，56℃温浴45min，再99℃裂解10min；②将离心管投入-20℃冰箱内迅速降温至常温，再加吸附液200μL，后放入离心机内13000r/min离心2min，开盖后去离心套管，再加入吸附液800μL，吸附珠悬液20μL混合均匀，室温静置15min；③8000r/min离心1min，除去上清液，向沉淀物加入-20℃漂洗液800μL，充分混匀；④8000r/min离心1min，去漂洗液；⑤开启管盖56℃烘干吸附珠2min；⑥加洗脱液20μL，充分混匀后56℃保温15min，4℃保存待扩增用。
采用AmpFISTR IdentifilerPlus试剂盒 在 9700 型扩增仪上对 16 个基因座进行复合扩增，体系为 20μL，其中 DNA 模板8μL，28个循环反应。取 30μL 内标 LIZ500 和1000μL 去离子甲酰胺混合，取混合物10μL 加入1μL 扩增产物，以 3500XL 遗传分析仪毛细管电泳，Collection 软件收集数据，GeneMapperID-X软件做等位基因分型。三、结果
在两个案例中，均获得完整STR分型，图谱峰高均在1500以上，均衡性较好，质量高；将结果导入DNA数据库，案例1比中本地库人员；案例2比中全国库人员。据此，抓获上述犯罪嫌疑人，相关案件告破。
四、讨论
由于铁路流动性大、人员密集，发生在铁路上的盗窃案件，尤其是列车上的财物被盗案件通常不能明确案发时间和具体地点，没有传统意义上的现场，只遗留少量犯罪嫌疑人触摸过的物品（如钱包、捆扎物等），故在这些物品上发现提取到嫌疑人的指纹和脱落细胞成为侦破案件的关键。脱落细胞提取过程中肉眼很难发现，具体位置不能确定，如果盲目提取，难以获得所需要的靶DNA；如果大面积擦拭，靶DNA的浓度就会下降，且可能会遭到外来污染或干扰。为解决上述问题，在非渗透客体上遗留的汗潜指印处提取脱落细胞，是一种针对性强且又简单易行的方法。
痕迹检验时，常用502胶熏显法显现指印，但不是每一份检材均可显现出清晰、有比对鉴定价值的指纹。有一部分检材熏显后只能看到模糊不清或残缺不全的指印，这类指印在比对检验时没有利用价值，但却给DNA检验人员提取脱落细胞指明了方向，在指印处转移提取脱落细胞比盲目提取的检出率要高出很多。本文中的两例案件，都是在502胶熏显后的模糊指印处，利用擦拭转移法提取脱落细胞，最终获得较好的STR分型图谱。从图谱的峰值结果来看，经502胶熏显后的检材样本DNA的含量并不低，均能获得理想的STR分型。
根据笔者的实践经验，在转移提取时采用棉签二次擦拭转移法效果更佳，因为指印处的脱落细胞在502胶熏显过程中，发生了离子聚合，可将脱落细胞封在检材上，二次擦拭转移法通过反复擦拭、干湿结合，能最大限度地提取到脱落细胞。同时，由于检材上脱落细胞数量本来就少，转移提取后数量更少，为提高检出率，在提取纯化环节，可使用灵敏度更高的D盾试剂盒硅珠法进行提纯，并在复合扩增时适当调整模板DNA的用量及体系以获得较好的分型数据。
综上所述，经过502胶熏显后的检材仍可通过检验人体脱落细胞，获得STR分型，进行比对认定或入库查询，最大限度利用物证，为侦查破案提供证据。[参考文献]
[1]纪中华.交通事故中汗潜指印DNA检验[J].刑事技术，2015，40（2）：162-163.
[2]李忠杰，徐杰，何伟，等.手套印DNA检验在盗窃案件中的应用[J].刑事技术，2016，41（2）：170-172.
[3]董正志，韩清顺，郭科建，等.触摸痕中接触DNA检验概述[J].中国法医学杂志，2015，30（3）：270-272.
[4]黄艳梅，王萌鸽，赵兴春等.接触DNA在法医实践中的应用研究进展[J].中国法医学杂志，2016，31（2）：151-155.
[5]袁则平.棉签二次转移法有效提取现场手套印脱落细胞DNA[J].刑事技术，2013（5）：50-51.
[6]高婧宇，梁克偉，李鹏飞，等.“502”胶显现指纹后对脱落细胞DNA提取的影响研究[J].中国刑警学院学报，2014（2）：52-53.