目的探究叶酸和维生素B₆及维生素B₁₂缺乏对大脑中动脉栓塞（MCAO）模型大鼠甲基代谢及认知功能的影响。方法将26只MCAO模型大鼠按随机数字表法分为Diet组和Ctrl组,各13只。Diet组喂食叶酸、维生素B₆和维生素B12缺乏饲料;Ctrl组喂食对照饲料,喂养时间为6周。采用高效液相色谱法检测血浆中甲基代谢产物同型半胱氨酸（Hcy）、S-腺苷甲硫氨酸（SAM）、S-腺苷同型半胱氨酸（SAH）的含量。采用DNA总甲基化定量检测试剂盒检测脑组织DNA总甲基化水平。采用Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能。结果与Ctrl组相比,Diet组血浆Hcy、SAH浓度升高[（36±9）μmol/L比（14±4）μmol/L、（13.9±1.5）μmol/L比（8.8±1.9）μmol/L],血浆SAM浓度降低[（10.4±2.0）μmol/L比（16.7±1.7）μmol/L], DNA总甲基化水平降低[（0. 47±0.03）%比（0. 62±0.04）%],第3、4、5天定向航行实验平均逃避潜伏期时间增加[（51±9）s比（32±7）s、（47±8）s比（30±7）s、（45±8）s比（25±9）s],学习记忆能力和空间探索能力下降,差异均有统计学意义（均P <0.05）。结论叶酸、维生素B₆和维生素B₁₂缺乏可导致MCAO模型大鼠Hcy水平升高、DNA甲基化水平下降及认知功能损害。