纯化与未纯化重组PVA表位EC1-2在检测抗PVA抗体中的比较

来源 :中国皮肤性病学杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:tenderboy
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目的比较纯化与未纯化重组寻常型天疱疮抗原(pemphigus vulgaris antigen,PVA)的细胞外区(extracel-lular domain,EC)1-2表位(EC1-2)在检测抗PVA抗体中的差异,以提高检测抗PVA抗体的敏感性.方法在构建EC1-2重组质粒的基础上进行融合蛋白的表达,并依据亲和层析的原理进行该融合蛋白的纯化.采用免疫印迹方法分别将纯化前后的EC1-2融合蛋白应用于寻常型天疱疮(PV)患者的血清学检测.结果22例被测PV患者血清中,用纯化前EC1-2融合蛋白进行检测的阳性率为54.5%,用纯化后的融合蛋白进行检测的阳性率为77.3%.结论以纯化后的EC1-2融合蛋白为抗原底物,其抗PVA抗体的检出率显著高于纯化前,为临床特异性诊断PV提供了新方法.
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