山羊痘病毒P32基因重组表达载体的构建及原核表达

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以含山羊痘病毒贵州LD株P32基因的质粒pMD18-T—P32/LD为模板,应用PCR方法扩增P32基因,将该基因片段克隆至原核表达载体pET-28a,构建了重组表达载体pET-28a—P32/LD,转化大肠杆菌BL21(DE3)中并诱导表达。SDS—PAGE分析结果显示,有分子量约为35.5ku的融合蛋白获得表达,与预期结果相符;Western—Blotting证实该表达蛋白具有免疫学活性。P32蛋白的成功表达为山羊痘基因工程疫苗的研制及诊断方法的建立奠定了基础。
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