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目的
通过对多种支原体污染去除方法治疗效果进行比较,找到适于人肝癌细胞系C3A去除支原体污染的最佳处理方法。
方法通过聚合酶链反应(PCR)检测C3A细胞培养物中支原体污染,并采用环丙沙星、加温处理、商品化支原体清除剂Plasmocure、人原代巨噬细胞体外共培养等方法对支原体污染样本进行处理,透射电镜(TEM)和实时荧光定量PCR(Q-PCR)对Plasmocure处理前后的细胞形态和基因表达进行比较分析。
结果Plasmocure成功清除支原体且无复发,环丙沙星清除支原体后复发,加温处理、巨噬细胞共培养法导致细胞死亡清除失败;电镜观察Plasmocure处理后细胞无支原体,生长良好,ALB、TF、CYP3A4表达较污染组明显增高(P<0.01)。
结论Plasmocure是支原体污染的有效处理方法并且能显著恢复细胞形态及基因表达。