人体胰腺癌细胞株PANC-1中四环素可诱导的周期素D1表达抑制系统的建立

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[目的]在人体胰腺癌细胞株PANC-1中建立一个四环素可调控周期素D1表达系统。研究抑制周期素D1对胰腺癌细胞的影响。[方法]反义周期素D1质粒通过两次稳定转染进入胰腺癌细胞株PANC-1细胞中,其表达调控系统采用Tet-Off系统(四环素调控系统)。通过抑制周期素D1表达对PANC-1细胞生长、集落形成能力以及周期素蛋白表达的影响,评价此系统的可调控性和有效性。[结果]通过第一次转染pTet—Off质粒,选择两个最佳表达克隆行第二次转染DTRE-反义周期素D1质粒,并通过免疫印记测定挑选出能在Tet—O
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