MDR1启动子的克隆及其转录活性的检测

来源 :广东医学院学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：feiwu111

【摘要】

：

目的克隆人多药耐药基因1（MDR1）5＇非编码区启动子序列,并检测该段启动子在人肝癌细胞株HepG2中的转录活性。方法提取HepG2肝癌细胞基因组DNA,PCR扩增人MDR1启动子序列（-1 040-＋288

【作者】

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张秀娟闫吕彬赵聪聪陈春玲吴嫦丽

【机构】

：

广东医科大学生理学教研室,广东医科大学图书馆

【出处】

：

广东医学院学报

【发表日期】

：

2016年3期

【关键词】

：

多药耐药基因1 启动子克隆转录 multidrug resistance gene 1 promoter gene cloning transcrip

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目的克隆人多药耐药基因1（MDR1）5＇非编码区启动子序列,并检测该段启动子在人肝癌细胞株HepG2中的转录活性。方法提取HepG2肝癌细胞基因组DNA,PCR扩增人MDR1启动子序列（-1 040-＋288）;采用基因重组技术构建由MDR1启动子驱动的荧光素酶报告基因载体,将该载体瞬时转染HepG2细胞,通过双荧光素酶报告基因试剂盒检测该MDR1启动子在HepG2细胞的转录活性。结果 PCR扩增出人MDR1启动子（-1 040-＋288）片段,PCR鉴定、酶切鉴定及测序鉴定均证实该段启动子驱动的荧光素酶

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