不同浓度表儿茶素没食子酸酯对体外培养成骨细胞的影响

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目的研究不同浓度表儿茶素没食子酸酯(Epigallocatechin gallate,EGCG)对体外培养成骨细胞的影响,确定最大作用浓度(最大抑制浓度或促进浓度)。方法取新生SD大鼠的颅骨进行成骨细胞诱导培养,第3代细胞中分别加入浓度为0、1、10、20、30和40μmol/L的EGCG+含10%胎牛血清DMEM培养基培养。应用CCK-8法、茜素红染色和硝酸银染色法、ELISA法观察并测定EGCG对体外培养成骨细胞的增殖、矿化结节形成及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。结果与0μmol/L浓度组比较,EGCG(10~20)μmol/L浓度组具有明显促进增殖的作用;30μmol/L及以上浓度组表现出对大鼠成骨细胞的抑制作用;在不同浓度EGCG中培养7 d或14 d,可以清晰观察到矿化组织形成,(10~20)μmol/L EGCG培养的细胞矿化结节形成数量显著多于对照组;血管内皮生长因子(VEGF)检测显示EGCG(10~20)μmol/L浓度组促进成骨细胞分泌VEGF的作用最强,30μmol/L及以上浓度对VEGF的分泌具有抑制作用。结论 EGCG(10~20)μmol/L浓度组对体外培养的成骨细胞有明显的促进增殖作用,30μmol/L及以上浓度组表现出对成骨细胞的抑制作用。
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