重组腺病毒Ad5hBDNFEGFP的构建及体外转染大鼠间充质干细胞后基因表达

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目的:构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因为标志基因、人脑源性神经营养因子(hBDNF)基因为目的基因的重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,体外转染大鼠骨髓间充质干细胞(rMSCs),探讨转染效率及转染基因的表达情况。方法:构建穿梭质粒pDC316-hBDNF-mCMV-EGFP;利用AdMax包装系统,穿梭质粒与骨架质粒共转染293细胞,同源重组产生复制缺陷型重组腺病毒Ad5-hBDNF-EGFP,经反复感染293细胞扩增病毒。SD大鼠骨髓,体外分离、培养rMSCs,流式细胞仪检测rMSCs表面
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