【摘 要】
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目的 探究糖尿病肾病（diabetic kidney disease, DKD）血瘀证大鼠肾损害与肾脏铁死亡的潜在机制。方法 将50只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、DKD组、DKD血瘀证组。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法复制DKD大鼠模型，采用尾静脉注射右旋糖酐的方法复制DKD血瘀证模型。实验过程中观察大鼠血瘀证表现及检测24 h尿蛋白、血清肌酐、血尿素氮、血液流变学指标，采用苏木精-伊红染色、M
【基金项目】
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河南省中医药科学研究专项重点课题（20-21ZY1003）； 全国中医药创新骨干人才培养项目； 河南省中医药拔尖人才培养项目专项课题（2019ZYBJ17）；
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目的 探究糖尿病肾病（diabetic kidney disease, DKD）血瘀证大鼠肾损害与肾脏铁死亡的潜在机制。方法 将50只SPF级雄性SD大鼠分为对照组、DKD组、DKD血瘀证组。采用腹腔注射链脲佐菌素的方法复制DKD大鼠模型，采用尾静脉注射右旋糖酐的方法复制DKD血瘀证模型。实验过程中观察大鼠血瘀证表现及检测24 h尿蛋白、血清肌酐、血尿素氮、血液流变学指标，采用苏木精-伊红染色、Masson染色、PAS染色观察肾脏的组织形态，采用透射电子显微镜观察铁死亡典型细胞的线粒体变化；采用免疫组织化学法、Western blot法检测肾组织铁死亡相关蛋白[长链酯酰辅酶A合成酶4（Acyl-CoA synthetase long chain family member 4,ACSL4）、谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4）]及肾脏纤维化指标[纤维连接蛋白（fibronectin, FN）、Ⅳ型胶原蛋白（typeⅣcollagen, Col-Ⅳ）]的表达水平。结果 与对照组比较，DKD组大鼠肾脏病理变化加重，线粒体损伤明显，24 h尿蛋白含量，血清肌酐、血尿素氮水平及全血黏度、血浆黏度明显升高（P＜0.05）,肾脏ACSL4、FN和Col-Ⅳ及其mRNA表达水平明显升高（P＜0.05）,GPX4蛋白及其mRNA表达水平明显降低（P＜0.05）。DKD血瘀证大鼠出现唇色黯淡、眼球黯红、耳廓紫红、舌下脉络紫黯等血瘀证表现，24 h尿蛋白和血清肌酐、血尿素氮水平明显高于DKD组，光学显微镜下可见肾脏出现明显的系膜基质增生、肾小球萎缩、肾间质胶原沉积和纤维化，电子显微镜下可见肾组织细胞线粒体损伤明显，嵴基本断裂，ACSL4、FN、Col-Ⅳ及其mRNA表达水平较DKD组明显上升（P＜0.05）,GPX4蛋白及其mRNA表达水平较DKD组明显下降（P＜0.05）。结论 DKD血瘀证大鼠肾脏损害更加严重，其机制可能与GPX4、ACSL4介导的铁死亡有关。
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