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【摘 要】建立反相高效液相色谱法测定复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量。方法：采用安捷伦 C18色谱柱（218mm×4.6mm，5μm），甲醇-乙腈-水（25：20：55），检测波长为240nm，流速为1.0ml/min，柱温为30℃。醋酸地塞米松在18～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系（r=0.99995）。醋酸地塞米松平均回收率分别为99.3%。结论：本法简便、准确，可用于复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量测定。
【关键词】复方口腔溃疡贴膜剂；含量；测定
复方口腔溃疡贴膜剂主要用于口腔溃疡。口腔溃疡，又称为口疮，是发生在口腔粘膜上的表浅性溃疡，溃疡面为凹、周围充血，可因刺激性食物引发疼痛，一般一至两个星期可以自愈。口腔溃疡诱因可能是局部创伤、精神紧张、食物、药物、激素水平改变及维生素或微量元素缺乏。醋酸地塞米松是肾上腺皮质激素药。醋酸地塞米松具有抗炎、抗过敏作用，能抑制结缔组织的增生，降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，减少炎性渗出量，抑制组胺及其他毒性物质的形成和释放。本实验采用高效液相色谱法对复方口腔溃疡贴膜剂中的醋酸地塞米松的进行了含量测定。
1.仪器与试药
1.1仪器
722s分光光度计（上海精科有限公司）、320 XT 电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）、KQ2200E超声波清洗器（上海昨非实验室设备有限公司）、FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）、CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）、pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）、德国TKAGenPure超纯水系统（莱比信（中国）科技发展有限公司）、德国优莱博TW20通用水浴槽（上海沃珑仪器有限公司）。
1.2色谱柱
安捷伦 C18色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品
醋酸地塞米松 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂
甲醇（济南世纪通达化工有限公司）、乙腈（常州市宣明化工有限公司）、冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司）、三乙胺（常州市宣明化工有限公司）、庚烷磺酸钠（济南世纪通达化工有限公司）、磷酸二氢钠（常州市宣明化工有限公司）。
1.5试药
复方口腔溃疡贴膜剂。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-12]。流动相：甲醇-乙腈-水（25：20：55），检测波长：240nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按醋酸地塞米松峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取醋酸地塞米松对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取复方口腔溃疡贴膜剂适量，置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理十分钟使溶解，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4专属性试验
在处方中去醋酸地塞米松，按方中比例和制备工艺方法制成阴性制剂。照2.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在醋酸地塞米松出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5精密度试验
精密称取醋酸地塞米松对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为20μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.76%，表明本方法精密度良好。
2.6对照品的线性考察
精密称取醋酸地塞米松对照品15mg，置250ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，醋酸地塞米松在18～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7重现性试验
称取同一批的复方口腔溃疡贴膜剂样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.91%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的醋酸地塞米松对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.3%，RSD=0.86%。结果表明此方法的回收率良好。
2.9样品稳定性试验
取同一批复方口腔溃疡贴膜剂样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、2、4、6、8、10、12小时，精密吸取供试品溶液10μl 注入液相色谱仪中，记录色谱图。测定复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的RSD=0.83%。结果表明供试品12小时内稳定。
3.结论
分别考察甲醇-缓冲液（磷酸二氢钠6.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加三乙胺1ml）（30∶70），25mmol·L-1磷酸盐缓冲液（pH3.0）（50∶50），水（含0.164mol/L磷酸，用三乙胺调pH值至3.5）-乙腈（40：60），乙腈-四氢呋喃-三乙胺磷酸缓冲液（40：10：60），水（含0.164mol/L磷酸，用三乙胺调pH值至3.5）-乙腈（30：70），甲醇-乙腈-水（25：20：55），甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液（每1000mL的缓冲液含0.5mol/L溴化四丁基铵45mL，用磷酸调节pH至3.5）（体积比40∶60）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-水（25：20：55）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-乙腈-水（25：20：55）为流动相。本实验表明此方法可用于复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量测定。复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量为标示量的95-105%。
【参考文献】
[1]唐军，郑志伟，方焱，张善堂.高效液相色谱法同时测定氯地乳膏中氯霉素与地塞米松的含量及其稳定性研究[J].安徽医药，2007（04）.
[2]袁建平，李文德.HPLC法测定眼药水中的地塞米松磷酸钠及分解产物[J].现代应用药学，1995（03）.
[3]庞捷.复方醋酸铝搽剂含量测定方法的选择[J].海峡药学，2009（06）.
[4]倪晓霞，郑绍忠.高效液相色谱法测定醋酸地塞米松乳膏中醋酸地塞米松含量[J].海峡药学，2010（11）.
[5]卢晓梅.HPLC法测定醋酸地塞米松搽剂中醋酸地塞米松的含量[J].齐鲁药事，2011（09）.
[6]劉珊珊.HPLC同时测定氯地霜中氯霉素和醋酸地塞米松的含量[J].药物分析杂志，1999（03）.
[7]胡道德，田丰，刘皋林.复方地塞米松搽剂的制备及质量控制[J].药学实践杂志，2005（06）.
[8]郑晓玲，国强，滕彦，林季建.高效液相法测定聚丙交酯微球中醋酸地塞米松的含量[J].中国现代应用药学，2005（04）.
[9]张建堂.HPLC法测定复方左氧氟沙星地塞米松喷雾剂中地塞米松磷酸钠的含量[J].海峡药学，2010（09）.
[10]吴洪文，吴敏.RP-HPLC法测定复方鼻用软膏中醋酸地塞米松含量[J].中国药师，2004（07）.
[11]严玲.RP-HPLC法测定复方维A酸软膏中醋酸地塞米松的含量[J].中国药房，2007（07）.
[12]范才荣.反相高效液相色谱法测定复方地薄铝搽剂中醋酸地塞米松的含量[J].医药导报，2006（08）.
【关键词】复方口腔溃疡贴膜剂；含量；测定
复方口腔溃疡贴膜剂主要用于口腔溃疡。口腔溃疡，又称为口疮，是发生在口腔粘膜上的表浅性溃疡，溃疡面为凹、周围充血，可因刺激性食物引发疼痛，一般一至两个星期可以自愈。口腔溃疡诱因可能是局部创伤、精神紧张、食物、药物、激素水平改变及维生素或微量元素缺乏。醋酸地塞米松是肾上腺皮质激素药。醋酸地塞米松具有抗炎、抗过敏作用，能抑制结缔组织的增生，降低毛细血管壁和细胞膜的通透性，减少炎性渗出量，抑制组胺及其他毒性物质的形成和释放。本实验采用高效液相色谱法对复方口腔溃疡贴膜剂中的醋酸地塞米松的进行了含量测定。
1.仪器与试药
1.1仪器
722s分光光度计（上海精科有限公司）、320 XT 电子分析天平（上海精科天美贸易有限公司）、KQ2200E超声波清洗器（上海昨非实验室设备有限公司）、FL2200-2高效液相色谱仪（浙江福立分析仪器有限公司）、CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）、pHS-2C型精密酸度计（上海精科雷磁厂）、德国TKAGenPure超纯水系统（莱比信（中国）科技发展有限公司）、德国优莱博TW20通用水浴槽（上海沃珑仪器有限公司）。
1.2色谱柱
安捷伦 C18色谱柱（218 mm×4.6mm，5μm）。
1.3对照品
醋酸地塞米松 购自中国药品生物制品检定所。
1.4试剂
甲醇（济南世纪通达化工有限公司）、乙腈（常州市宣明化工有限公司）、冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司）、三乙胺（常州市宣明化工有限公司）、庚烷磺酸钠（济南世纪通达化工有限公司）、磷酸二氢钠（常州市宣明化工有限公司）。
1.5试药
复方口腔溃疡贴膜剂。
2.测定方法确定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[1-12]。流动相：甲醇-乙腈-水（25：20：55），检测波长：240nm，流速：1.0m·min-1。柱温：30℃。理论板数按醋酸地塞米松峰计算应不得低于2000。
2.2对照品溶液的制备
精密称取醋酸地塞米松对照品适量，置容量瓶中，加流动相制成每1mL含20μg的溶液，即得。
2.3供试品溶液的制备
取复方口腔溃疡贴膜剂适量，置50mL量瓶中，加流动相适量，超声处理十分钟使溶解，放置至室温，加流动相稀释至刻度，摇匀，用微孔滤膜（0.45μm）滤过，即得。
2.4专属性试验
在处方中去醋酸地塞米松，按方中比例和制备工艺方法制成阴性制剂。照2.3项下供试品溶液的制备方法制成阴性液，依上述方法测定，结果在醋酸地塞米松出峰处阴性液无色谱峰，结果阴性试验没有干扰，表明本方法专属性良好。
2.5精密度试验
精密称取醋酸地塞米松对照品适量，加流动相使溶解，制成浓度为20μg·mL-1的供试品溶液。照上述色谱条件，精密吸取10μl，连续进样6次，记录峰面积。结果，RSD=0.76%，表明本方法精密度良好。
2.6对照品的线性考察
精密称取醋酸地塞米松对照品15mg，置250ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀释至刻度，摇匀，分别精密吸取1.5、2.5、3.0、3.5、4.5mL，置于5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密上述溶液吸取10μL，注人液相色谱仪，依照2.1项下的色谱条件测定，记录色谱峰。以峰面积（Y）为纵坐标，对照品进样量（X）为横坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。结果表明，醋酸地塞米松在18～60μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。
2.7重现性试验
称取同一批的复方口腔溃疡贴膜剂样品6份，按测定方法项下的方法制备供试品溶液，测定含量，并计算样品的RSD值，结果RSD为0.91%，结果表明此方法的重现性良好。
2.8准确度试验
精密称取已知含量的样品6份，分别加入一定量的醋酸地塞米松对照品，上述方法进行测定，计算回收率，平均回收率为99.3%，RSD=0.86%。结果表明此方法的回收率良好。
2.9样品稳定性试验
取同一批复方口腔溃疡贴膜剂样品，按2.3项下的供试品制备方法制备供试品，将供试品置室温下放置，分别于第0、2、4、6、8、10、12小时，精密吸取供试品溶液10μl 注入液相色谱仪中，记录色谱图。测定复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的RSD=0.83%。结果表明供试品12小时内稳定。
3.结论
分别考察甲醇-缓冲液（磷酸二氢钠6.0g，加水溶解并稀释至1000ml，加三乙胺1ml）（30∶70），25mmol·L-1磷酸盐缓冲液（pH3.0）（50∶50），水（含0.164mol/L磷酸，用三乙胺调pH值至3.5）-乙腈（40：60），乙腈-四氢呋喃-三乙胺磷酸缓冲液（40：10：60），水（含0.164mol/L磷酸，用三乙胺调pH值至3.5）-乙腈（30：70），甲醇-乙腈-水（25：20：55），甲醇-0.01mol/L磷酸二氢钠缓冲液（每1000mL的缓冲液含0.5mol/L溴化四丁基铵45mL，用磷酸调节pH至3.5）（体积比40∶60）不同比例的流动相，结果以甲醇-乙腈-水（25：20：55）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用甲醇-乙腈-水（25：20：55）为流动相。本实验表明此方法可用于复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量测定。复方口腔溃疡贴膜剂中醋酸地塞米松的含量为标示量的95-105%。
【参考文献】
[1]唐军，郑志伟，方焱，张善堂.高效液相色谱法同时测定氯地乳膏中氯霉素与地塞米松的含量及其稳定性研究[J].安徽医药，2007（04）.
[2]袁建平，李文德.HPLC法测定眼药水中的地塞米松磷酸钠及分解产物[J].现代应用药学，1995（03）.
[3]庞捷.复方醋酸铝搽剂含量测定方法的选择[J].海峡药学，2009（06）.
[4]倪晓霞，郑绍忠.高效液相色谱法测定醋酸地塞米松乳膏中醋酸地塞米松含量[J].海峡药学，2010（11）.
[5]卢晓梅.HPLC法测定醋酸地塞米松搽剂中醋酸地塞米松的含量[J].齐鲁药事，2011（09）.
[6]劉珊珊.HPLC同时测定氯地霜中氯霉素和醋酸地塞米松的含量[J].药物分析杂志，1999（03）.
[7]胡道德，田丰，刘皋林.复方地塞米松搽剂的制备及质量控制[J].药学实践杂志，2005（06）.
[8]郑晓玲，国强，滕彦，林季建.高效液相法测定聚丙交酯微球中醋酸地塞米松的含量[J].中国现代应用药学，2005（04）.
[9]张建堂.HPLC法测定复方左氧氟沙星地塞米松喷雾剂中地塞米松磷酸钠的含量[J].海峡药学，2010（09）.
[10]吴洪文，吴敏.RP-HPLC法测定复方鼻用软膏中醋酸地塞米松含量[J].中国药师，2004（07）.
[11]严玲.RP-HPLC法测定复方维A酸软膏中醋酸地塞米松的含量[J].中国药房，2007（07）.
[12]范才荣.反相高效液相色谱法测定复方地薄铝搽剂中醋酸地塞米松的含量[J].医药导报，2006（08）.