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目的 从体外模拟抗体的体内成熟过程,以获得高亲和力抗肝癌单链抗体.方法采用错配聚合酶链反应(PCR)法随机突变抗肝癌单链抗体重链和轻链可变区,构建抗肝癌噬菌体抗体次级突变库,利用噬菌体展示技术从中筛选出高亲和力单链抗体突变株.结果抗肝癌噬菌体抗体次级突变库容为4.5×107,经过3轮富集筛选和酶联免疫吸附法鉴定获得2株突变株M90、M116,不仅保留原始克隆的特异性,而且相对亲和力指数分别为原始克隆的1.7倍和2倍.结论错配PCR结合噬菌体展示技术是提高单链抗体亲和力的一种有效且简便的手段。