【摘 要】
：
目的基于多重PCR方法针对Turner综合征患者，建立快速检测Y染色体特有序列的多重PCR方法。方法在Y染色体不同区域选择9个基因设计引物，其中Y染色体短臂特有基因为SRY、TBL1Y、TSPY，长臂特有基因为DDX3Y、HSFY1、RPS4Y2、CDY1，以及X和Y染色体拟常染色体区(PAR)短臂的SHOX和长臂的SPRY3基因。建立并优化Y染色体9个基因的多重PCR方法，通过使用基因组DNA不同用量对多重PCR进行灵敏性测试，并对确诊的36例Turner综合征患者(2例患者核型携带mar，1例患者核型
【机 构】
：
山东大学齐鲁医学院，济南 250100济宁医学院附属医院内分泌遗传代谢科，山东 272029;济宁医学院临床医学院，山东 272067济宁医学院附属医院内分泌遗传代谢科，山东 272029香港大学儿童
论文部分内容阅读
目的基于多重PCR方法针对Turner综合征患者，建立快速检测Y染色体特有序列的多重PCR方法。
方法在Y染色体不同区域选择9个基因设计引物，其中Y染色体短臂特有基因为SRY、TBL1Y、TSPY，长臂特有基因为DDX3Y、HSFY1、RPS4Y2、CDY1，以及X和Y染色体拟常染色体区(PAR)短臂的SHOX和长臂的SPRY3基因。建立并优化Y染色体9个基因的多重PCR方法，通过使用基因组DNA不同用量对多重PCR进行灵敏性测试，并对确诊的36例Turner综合征患者(2例患者核型携带mar，1例患者核型为45，X[40]/47XYY[21])以及1例核型为46，X， mar的男性矮小症患者进行检测。
结果优化多重PCR反应体系(50 μL)结果，每对引物上下游的终浓度为0.1 μM时，9对引物的多重PCR反应扩增出与理论大小一致的目的条带，无非特异性扩增，条带清晰易区分。在灵敏性试验中，多重PCR反应体系的基因组DNA用量低至1 ng时条带仍清晰可见。使用该方法检测36例Turner综合征患者，1例核型为45，X[40]/47XYY[21]的Turner综合征患者扩增出Y染色体特有目的基因，35例Turner综合征患者只扩增出SHOX和SPRY3两个目的基因，而无Y染色体特有的7个基因，与患者临床表现一致。
结论本研究建立的9个基因多重PCR反应体系可快速准确的筛查Turner综合征患者是否携带Y染色体物质，具有检测成本低、操作简便、特异性强、检测周期短等优点，可供临床及时检出携带Y染色体物质的Turner综合征患者，为是否预防性切除性腺而防止恶性性腺肿瘤的发生提供诊断依据。
其他文献
间充质干细胞(MSCs)近年来被广泛应用于治疗免疫性及炎症性疾病，对炎症性肠病(IBD)，尤其克罗恩病复杂肛瘘的临床治疗结果令人振奋。目前MSCs的临床前研究备受关注，大量的研究致力于提高MSCs的疗效。其中，通过使用细胞因子、药物、改变培养基等方法在体外预先处理MSCs以增强其疗效的策略——预处理MSCs的策略已经在包括IBD在内的众多疾病中被证实有效。本文主要就这一策略在IBD中的应用展开综述。
肝细胞癌是全球第六大常见癌症，也是癌症死亡的第三大原因。多数患者就诊时已处于晚期，而传统的治疗方法不能有效地改善肝细胞癌患者的生存率，且复发率极高。免疫治疗成为近年来的研究热点，免疫检查点抑制剂的出现给晚期肝细胞癌患者带来了极大的希望。本文现就免疫检查点抑制剂在肝细胞癌治疗中的研究进展进行综述。
免疫检查点抑制剂(ICIs)的出现，开启了肿瘤免疫治疗的新时代。对于高度微卫星不稳定(MSI-H)结直肠癌患者，ICIs往往有较好疗效，其临床应用也逐渐从晚期后线移至一线治疗；然而对于微卫星稳定(MSS)结直肠癌患者，ICIs单药并无明显作用。近年来，随着ICIs联合放化疗等治疗方案的应用，ICIs治疗MSS型结直肠癌患者效果得到改善。本文拟对近年来免疫检查点治疗在结直肠癌上的应用进行总结与展望。
肝癌是世界上发病率和死亡率均位前列的恶性肿瘤之一，其发生发展机制复杂多样。铁死亡是一种铁离子依赖性的细胞程序性死亡方式，以细胞内脂质过氧化物积累和氧化还原平衡紊乱为特征。越来越多的研究发现铁死亡在肝癌中发挥着重要的作用，促进铁死亡可抑制肝癌发展。本文回顾近年来肝癌铁死亡的相关研究，归纳铁死亡在肝癌中的作用机制。
脆性X综合征(fragileXsyndrome，FXS)是导致遗传性智力障碍和孤独症谱系障碍(autisticspectrumdisorder，ASD)最常见的单基因病。超过99%的FXS都是由FMR1基因5′非翻译区CGG重复的扩增动态突变所致，临床上表现为不同程度的认知功能障碍，伴有特殊面容、行为及心理异常。对FMR1基因进行检测能够尽快明确病因、及早干预并指导家系成员再生育。本指南结合了国内外的相关研究和指南共识，总结了FXS相关的遗传学知识和临床处置要点，期望能为临床工作者提供帮助，以促进FXS的
目的探讨无创产前检测(non-invasiveprenataltesting，NIPT)筛查高风险中真假阳性中的Z值，旨在提高实践中的NIPT准确性。方法收集NIPT成功的标本共计24384例，对NIPT筛查提示为T21/T18/T13高风险的病例，分析探讨其确诊后真阳性与假阳性中Z值判定范围。结果本次NIPT共筛查出高风险共计335例，其中256例选择进行产前诊断，真阳性153例(59.77%)，假阳性103例(40.23%)，AUC达到0.9994。NIPT筛查提示21三体高风险时，当Z
目的分析7例低深度全基因组测序(copynumbervariationsequencing，CNV-seq)检出仅涉及NRXN1基因的2p16.3杂合缺失胎儿的遗传学检查结果、拷贝数变异(copynumbervariation,CNV)来源及妊娠结局，为产前诊断和遗传咨询提供依据。方法7例产前诊断样本均通过CNV-seq检测发现2p16.3杂合缺失，进一步通过实时荧光定量PCR(quantitativereal-timePCR，qPCR)进行验证，明确涉及的NRXN1基因缺失的具体区域，并对CNV进行父母
目的评估高通量测序技术在地中海贫血(简称地贫)检测中的运用价值，对黎族地区实行更精准的地贫检测，为地贫防控以及建立地贫数据库提供新的数据支持。方法海南省保亭黎族苗族自治县随机选取1842名中学生作为研究对象，其中黎族1249人，汉族454人，其他少数民族139人。采集外周血样，采用gap-PCR结合高通量测序法进行地贫基因检测。结果共检测出22种α地贫基因型、5种β地贫基因型以及21种α复合β地贫基因型。黎族地贫携带率为78.14%，汉族为24.01%，其他少数民族为28.06%。此外高通量测序发现22例
目的探讨原发性卵巢功能不全(primaryovarianinsufficiency，POI)患者miRNA-146、氧化低密度脂蛋白(oxidizedlowdensitylipoprotein，OX-LDL)、活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS)的表达及临床意义。方法100例POI患者作为观察组，随机匹配100例卵巢功能正常的妇女作为对照组。通过荧光定量PCR(real-timePCR，qRT-PCR)检测血清miRNA-146，酶联免疫吸附测定(enzyme-linkedimmu
目的分析3个FKRP基因变异导致肢带型肌营养不良2I型(limbgirdlemusculardystrophytype2I，LGMD2I)家系的临床表型和基因变异特点。方法收集3例先证者的临床资料并对其进行肌肉活检。提取先证者及其家系成员的外周血样，采用全外显子组测序技术筛查先证者致病基因，确定可疑致病变异后对家系成员采用Sanger测序进行验证。结果先证者1和先证者2均存在双下肢无力的症状，其中先证者1行走能力丧失伴有肺通气功能障碍。先证者3存在下肢疼痛和剧烈运动后心悸、憋喘症状。3例先证者肌肉病理可见