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目的
构建新型抗氧化低密度脂蛋白纳米铁(anti-Ox-LDL-MNPs)探针,探讨该探针检测ApoE-/-小鼠粥样斑块的价值。
方法采用化学连接剂将Ox-LDL单克隆抗体与二巯基丁二酸(DMSA)修饰的磁赤铁矿纳米粒子(MNPs)相结合,构建具有免疫活性的分子探针。通过ELISA、透射电子显微镜(TEM)等方法检测其免疫活性及形态。ApoE-/-小鼠高脂饮食8周,尾静脉注射Ox-LDL靶向及对照探针(IgG-MNPs),分别在注射前及注射后24 h行MRI,检查后处死小鼠取腹主动脉行病理学检查。行配对t检验分析数据。
结果Anti-Ox-LDL-MNPs和IgG-MNPs探针磁饱和强度高,分布均匀,生物活性较强,水合粒径分别为(21.5±3.3) nm及(22.3±4.1) nm。2组ApoE-/-小鼠腹主动脉平均信噪比(CNR)在探针注射前分别为20.89±1.50和20.84±5.47,注射后24 h anti-Ox-LDL-MNPs探针组小鼠CNR显著下降(7.30±1.19;t=5.373, P<0.01;n=5),IgG-MNPs探针组CNR略有下降(18.66±2.84;t=2.620,P>0.05;n=5)。免疫组织化学检查和普鲁士蓝染色证实Ox-LDL靶向探针在ApoE-/-小鼠腹主动脉壁斑块内沉积,与巨噬细胞共定位。
结论靶向Ox-LDL纳米铁MRI探针能活体检测动脉粥样硬化斑块Ox-LDL。