【摘 要】
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目的 研究趋化因子受体4(CXCR4)信号通路在调控心肌细胞凋亡和损伤修复过程中作用及其机制.方法 将细胞分成4组:正常组、模型组、rAAV9-CXCR4-NC组和rAAV9-CXCR4组.将浓度均
【机 构】
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江西省儿童医院 小儿心脏病治疗中心,江西南昌,330006
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目的 研究趋化因子受体4(CXCR4)信号通路在调控心肌细胞凋亡和损伤修复过程中作用及其机制.方法 将细胞分成4组:正常组、模型组、rAAV9-CXCR4-NC组和rAAV9-CXCR4组.将浓度均为200 nmol·L-1的rAAV9-CXCR4和rAAV9-CXCR4-NC通过脂质体介导法分别转染至rAAV9-CX-CR4-NC组、rAAV9-CXCR4组细胞,48 h后模型组、rAAV9-CXCR4-NC组、rAAV9-CXCR4组细胞先在37℃、5％CO2、95％N2的缺氧培养箱中封闭培养12 h,后经37℃、5％CO2、95％空气的培养箱中继续培养4 h构建缺氧富氧模型.正常组H9c2细胞常规培养.用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定细胞上清液的LDH水平,彗星实验测定各组细胞DNA损伤程度,免疫印迹测定各组细胞中CXCR4、基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)和热休克蛋白70(HSP)蛋白的相对表达水平.结果 正常组、模型组、rAAV9-CXCR4-NC组和rAAV9-CXCR4组细胞中的LDH的水平分别为(20.41±2.32),(85.56±3.68),(85.24±3.94)和(41.36±4.95)U·L-1;这4组的Olive尾矩分别为(1.02±0.12)％,(75.25±3.08)％,(72.34±5.74)％和(30.16±2.25)％;这4组的CXCR4的相对表达水平分别为1.02±0.08,1.87±0.19,1.82±0.23和4.25±0.88;这4组的SDF-1α的相对表达水平分别为0.97±0.09,1.78±0.12,1.81±0.15和4.13±0.65;这4组的HSP70的相对表达水平分别为1.02±0.11,1.56±0.16,1.60±0.12和4.82±0.15.上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);rAAV9-CXCR4组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 过表达CXCR4能够促进受损心肌细胞的修复,抑制其凋亡.
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