目的:研究吴茱萸碱（evodiamine, EVO）的肝细胞毒性及其机制。方法:将0.04～25μmol/L EVO分别作用于HepG2细胞24、48和72 h,用细胞增殖及毒性检测（cell counting kit-8,CCK-8）法检测细胞存活率。0.2、1和5μmol/L EVO处理HepG2细胞48 h,多功能酶标仪分别检测细胞培养上清液中谷丙转氨酶（alanine transaminase, ALT）、谷草转氨酶（aspartate aminotransferase, AST）、乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、碱性磷酸酶（alkaline phosphatase, ALP）活性,以及总胆红素（total bilirubin, TBIL）含量。用多功能酶标仪检测HepG2细胞内超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性和丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量。用分子对接探究EVO与凋亡、自噬和铁死亡相关蛋白结合情况。用线粒体膜电位荧光探针（superior alternative to JC-1,JC-10）和异硫氰酸荧光素标记的膜联蛋白/碘化丙啶（annexin V-fluorescein isothiocyanate/propidium iodide, Annexin V-FITC/PI）对HepG2细胞进行染色,流式细胞仪分别检测细胞线粒体膜电位（mitochondrial membrane potential, MMP）和细胞凋亡。用Western blot检测HepG2细胞凋亡相关蛋白caspase-9,caspase-3以及胆汁酸转运体胆盐输出泵（bile salt export pump, BSEP）和多耐药相关蛋白2（multidrug resistance-associated protein 2,MRP2）的表达水平。结果:0.04～25μmol/L EVO可降低HepG2细胞存活率,具有时间和剂量依赖关系。EVO处理HepG2细胞24、48和72 h的半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC50)分别为85.3、6.6和4.7μmol/L。0.2、1和5μmol/L EVO作用HepG2细胞48 h,细胞培养上清液中ALT、AST、LDH、ALP活性升高,TBIL含量增加。EVO可降低细胞中SOD活性,增加MDA含量。分子对接结果显示EVO与凋亡相关蛋白结合情况较好,JC-10和Annexin V-FITC/PI染色发现EVO可降低MMP,增加细胞凋亡率。Western blot结果表明EVO可上调caspase-9剪切蛋白和caspase-3剪切蛋白表达,并下调caspase-3前体蛋白、BSEP和MRP2蛋白表达。结论:0.2、1和5μmol/L的EVO具有肝细胞毒性,其毒性机制可能涉及脂质过氧化损伤、细胞凋亡和胆汁淤积。