【摘 要】
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本研究中为了构建含不同LUC报告基因的表达载体，利用TOYOBO公司pELuc（PEST）-test载体的ELuc′（PEST）基因替换yy621载体中的LUC基因，构建了yy625载体。利用PCR从pELuc（PEST）-test载体中克隆获得带有Bgl II和Xba I酶切位点的ELuc′（PEST）片段，经Bgl II和Xba I酶切后的片段插入到载体yy621的Bgl II和Xba I位点
【基金项目】
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国家自然科学基金项目（31660319）； 吉林省科技发展计划项目（20200402088NC）； 日本科学技术振兴机构项目（JST-ALCA）； 日本创新领域植物感知科研项目（Grant-in-Aid， 23120511， 25120712）；
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本研究中为了构建含不同LUC报告基因的表达载体，利用TOYOBO公司pELuc（PEST）-test载体的ELuc′（PEST）基因替换yy621载体中的LUC基因，构建了yy625载体。利用PCR从pELuc（PEST）-test载体中克隆获得带有Bgl II和Xba I酶切位点的ELuc′（PEST）片段，经Bgl II和Xba I酶切后的片段插入到载体yy621的Bgl II和Xba I位点之间，替换LUC基因。经菌落筛选、PCR鉴定和测序，阳性菌落中的ELuc′（PEST）序列与载体pELuc（PEST）-test中的ELuc（PEST）序列一致，表明载体625构建成功。筛选出更加灵敏、信号强的LUC报告基因，对于研究启动子序列中包含的基因调控元件有着重要的意义。
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