论文部分内容阅读
将Epstein-Barr（EB）病毒膜抗原基因（EBV-MA）称MA1和截去穿膜区的MA基因称MA2分别插入杆状病毒表达载体pVL-941。将两种重组质粒分别与杆状病毒DNA共转染sf9细胞后获得Baculo-MA1和Baculo-MA2两种重组病毒，表达产物分别位于重组病毒感染的细胞表面或释放到细胞培养液中。免疫荧光方法检查，在感染的细胞表面表达产物与抗MA的单克隆抗体特异性地结合，SDS-PAGE显示其分子量约220kD和150kD两条带，在Baculo-MA2感染的细胞培养液中仅含220kD的蛋白。薄层扫描表明MA表达量至少占细胞总蛋白量的30%。经DEAE-Sepharose FF和Sephacryl S300 HR纯化，SDS-PAGE检测其纯度可达90%以上。经纯化的MA1和MA2分别免疫小鼠，免疫血清与B95-8细胞膜上存在的EB病毒特异的膜抗原反应，并证明具有中和抗体活性。检测某些细胞免疫指标结果表明，经MA免疫的小鼠产生特异性的ADCC活性，提高NK活性。经纯化的MA在体外能促进T细胞增殖。