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重建的向量 pCANTAB 5 EE 被插入包含了一个 EcoRV 识别序列进 pCANTAB 的 34 搁浅 bpdouble 的 oligonucleotide 获得 5 E。Whitespot 症候群病毒(WSSV ) 染色体 DNA 被 sonication 碎裂主要在 0 的范围孤立碎片。8 ～ 2.0 kb，当时，碎片与 T4 DNA 聚合酶是钝结束的并且克隆 5 EE 进 pCANTAB 的 EcoRV 地点。图书馆的主要 recombinant 克隆是随机的选择 re-combinants