观察番茄红素(lyc)对缺氧复氧(H/R)引起的小鼠心肌细胞内质网应激及细胞凋亡的影响。
方法C57BL/6乳鼠心肌细胞培养72 h后随机数字表法分为4组，即正常对照组(对照组)、lyc组(lyc 5 μmol/L预处理)、H/R组(缺氧4 h，复氧6 h)和lyc＋H/R组(lyc 5 μmol/L预处理4 h后H/R处理)。采用CCK-8法检测心肌细胞存活率，AnnexinV-PI检测心肌细胞凋亡率，实时荧光定量聚合酶链反应检测转录激活因子6(ATF6)、真核细胞起始因子2α(eIF2α)和剪切X盒结合蛋白1 (sXbp-1) mRNA的表达水平。蛋白印迹法检测葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、B细胞淋巴瘤基因-2 (Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白的表达水平。氧自由基(ROS)试剂盒检测细胞内ROS含量。
结果H/R组乳鼠心肌细胞存活率明显低于对照组[(64.28±6.12)%比(100.00±4.98)%，P<0.01]，心肌细胞凋亡率明显高于对照组[(24.42±1.76)%比(5.16±1.31)%，P<0.01]，Bax/Bcl-2蛋白表达水平比值明显高于对照组(2.33±0.20比1.00±0.09，P<0.01)，CHOP蛋白表达水平明显高于对照组(1.98±0.15比1.00±0.12，P<0.01)，GRP78蛋白表达水平明显高于对照组(2.09±0.11比1.00±0.09，P<0.05)，ATF6、eIF2α和sXbp-1 mRNA表达水平均明显高于对照组(P均<0.01)，心肌细胞内ROS含量明显高于对照组[(262.13±22.03)%比(100.00±12.35)%，P<0.01]。而lyc＋H/R组乳鼠心肌细胞存活率明显高于H/R组[(81.75±6.85)%比(64.28±6.12)%，P<0.01]，细胞凋亡率明显低于H/R组[(17.24±2.02)%比(24.42±1.76)%，P<0.01]，Bax/Bcl-2蛋白表达水平比值明显低于H/R组(1.64±0.13比2.33±0.20, P<0.01)，CHOP蛋白表达水平明显低于H/R组(1.54±0.12比1.98±0.15，P<0.01), GRP78蛋白水平明显低于H/R组(1.53±0.12比2.09±0.11，P<0.01)，ATF6、eIF2α和sXbp-1 mRNA表达水平均明显低于H/R组(P均<0.05 )，心肌细胞内ROS含量明显低于H/R组[(171.18±19.09)%比(262.13±22.03)%，P<0.01]。
结论lyc可减轻心肌细胞H/R损伤，机制可能与抑制内质网应激，从而阻碍其激诱导的心肌细胞凋亡有关。